Gå direkte til indholdet
KYSE520
Væv
Spiserør
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumenter

KYSE520

Cell line · Varenummer 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KYSE520-cellelinjen er en human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC)-model, der stammer fra en primær tumor. Den er moderat differentieret og har været medvirkende til at undersøge epithelial-mesenchymal plasticitet (EMP) i spiserørskræft. KYSE520-celler udviser heterogenitet og består af både epitel-lignende (CD44v+) og mesenkym-lignende (CD44v-) subpopulationer. Disse to populationer er i stand til at omdanne hinanden, hvilket afspejler en dynamisk EMP-proces. Denne egenskab gør KYSE520 til en fremragende model til undersøgelse af kræftstamcelleegenskaber og kemoresistensmekanismer i ESCC.

Genetisk set udviser KYSE520-cellerne en bemærkelsesværdig epigenetisk regulering. Promotorregionen for JAM3-genet, en tumorundertrykker, er umethyleret i disse celler, hvilket gør det muligt at udtrykke det. JAM3 spiller en rolle i reguleringen af celleproliferation, migration og invasion gennem Wnt/β-catenin-signalering. Opretholdelsen af JAM3-ekspression i KYSE520 har været forbundet med undertrykkelse af aggressive kræftfænotyper.

I terapeutisk forskning er KYSE520-celler blevet brugt til at udforske den rolle, som fibroblastvækstfaktorreceptor-lignende 1 (FGFRL1) spiller. Undersøgelser har vist, at FGFRL1-deficiente KYSE520-celler udviser reduceret tumorvækst og bevægelighed sammen med et fald i udtrykket af matrixmetalloproteinase-1 (MMP-1) og fibroblastvækstfaktorbindende protein 1 (FGFBP1). Disse resultater understreger vigtigheden af FGFRL1 i tumorigenese og foreslår potentielle terapeutiske mål. Derudover giver EMP-dynamikken og de tilknyttede molekylære veje i KYSE520-celler indsigt i ESCC-progression og resistensmekanismer, hvilket bidrager til udviklingen af målrettede behandlinger.

Væv
Spiserør
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KYSE520 (Cytion katalognummer 305449)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Udtryk og modtagelighed

Onkogener
TP53, MYC
Mutationsprofil
Mutation: TP53, c.376-2A>T, Splice acceptor mutation

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a); 1:1 blanding
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 2 % FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
0,6 - 1,2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
58 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk