Pāriet uz saturu
KYSE520
Audums
Barības vads
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumenti

KYSE520

Cell line · Preces numurs 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KYSE520 šūnu līnija ir cilvēka barības vada plakanšūnu karcinomas (ESCC) modelis, kas iegūts no primārā audzēja. Tā ir vidēji diferencēta un ir bijusi noderīga, pētot epitēlija-mezenhimālo plastiskumu (EMP) barības vada vēža gadījumā. KYSE520 šūnām piemīt heterogenitāte, un tās sastāv gan no epitēlijveidīgām (CD44v+), gan mezenhīmiskām (CD44v-) subpopulācijām. Šīs divas populācijas spēj savstarpēji mainīties, atspoguļojot dinamisku EMP procesu. Šī īpašība padara KYSE520 par lielisku modeli vēža cilmes šūnu īpašību un ķīmorezistences mehānismu izpētei ESCC.

Ģenētiski KYSE520 šūnām piemīt ievērojama epigenētiskā regulācija. Šajās šūnās audzēja supresora JAM3 gēna promotora reģions nav metilēts, kas nodrošina tā ekspresiju. JAM3 ir svarīga loma šūnu proliferācijas, migrācijas un invazijas regulēšanā, izmantojot Wnt/β-katenīna signālus. JAM3 ekspresijas saglabāšana KYSE520 ir saistīta ar agresīvu vēža fenotipu nomākšanu.

Terapeitiskajos pētījumos KYSE520 šūnas ir izmantotas, lai izpētītu fibroblastu augšanas faktoram līdzīgā 1 receptoram (FGFRL1) nozīmi. Pētījumi liecina, ka FGFRL1 deficīta KYSE520 šūnām ir samazināta audzēja augšana un kustīgums, kā arī samazināta matriksa metaloproteināzes-1 (MMP-1) un fibroblastu augšanas faktoru saistošā proteīna 1 (FGFBP1) ekspresija. Šie atklājumi uzsver FGFRL1 nozīmi audzēju rašanās procesā un norāda uz potenciāliem terapeitiskiem mērķiem. Turklāt EMP dinamika un ar to saistītie molekulārie ceļi KYSE520 šūnās sniedz ieskatu ESCC progresijā un rezistences mehānismos, veicinot mērķtiecīgu ārstēšanas veidu izstrādi.

Audums
Barības vads
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
KYSE520 (Cytion kataloga numurs 305449)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Pazīmes un uzņēmība

Onkogēni
TP53, MYC
Mutāciju profils
Mutācija: TP53, c.376-2A>T, sazarojuma akceptora mutācija

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a); maisījums 1:1
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 2% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
0,6–1,2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
58 gadi
Etniskā piederība
Japāņu