Tartalomra ugrás
KYSE520
Szövet
Nyelőcső
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumentumok

KYSE520

Cell line · Termékszám 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A KYSE520 sejtvonal egy primer tumorból származó humán nyelőcső laphámsejtes karcinóma (ESCC) modell. Mérsékelten differenciált, és fontos szerepet játszott a nyelőcsőrák epiteliális-mesenchymális plaszticitásának (EMP) vizsgálatában. A KYSE520 sejtek heterogenitást mutatnak, mind epithelszerű (CD44v+), mind mesenchymális (CD44v-) alpopulációkból állnak. Ez a két populáció képes egymásba átalakulni, ami egy dinamikus EMP folyamatot tükröz. Ez a tulajdonság teszi a KYSE520-t kiváló modellé a rákos őssejtek tulajdonságainak és az ESCC kemorezisztencia mechanizmusainak tanulmányozására.

Genetikailag a KYSE520 sejtek figyelemre méltó epigenetikai szabályozást mutatnak. A tumorszuppresszor JAM3 gén promóter régiója ezekben a sejtekben nem metilálódik, ami lehetővé teszi az expresszióját. A JAM3 szerepet játszik a sejtproliferáció, a migráció és az invázió szabályozásában a Wnt/β-katenin jelátvitelen keresztül. A JAM3 expressziójának fenntartása a KYSE520-ban az agresszív rákfenotípusok elnyomásával hozható összefüggésbe.

A terápiás kutatásokban KYSE520 sejteket használtak a fibroblaszt növekedési faktorhoz hasonló receptor 1 (FGFRL1) szerepének feltárására. Vizsgálatok kimutatták, hogy az FGFRL1-hiányos KYSE520 sejtek csökkent tumor növekedést és motilitást mutatnak, a mátrix metalloproteináz-1 (MMP-1) és a fibroblaszt növekedési faktor kötő fehérje 1 (FGFBP1) expressziójának csökkenése mellett. Ezek az eredmények aláhúzzák az FGFRL1 jelentőségét a tumorigenezisben, és potenciális terápiás célpontokat javasolnak. Emellett az EMP dinamikája és a KYSE520 sejtek kapcsolódó molekuláris útvonalai betekintést nyújtanak az ESCC progressziójába és a rezisztencia mechanizmusaiba, hozzájárulva a célzott kezelések kifejlesztéséhez.

Szövet
Nyelőcső
Betegség
Laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
KYSE520 (Cytion katalógusszám: 305449)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Kifejeződés és fogékonyság

Onkogének
TP53, MYC
Mutációs profil
Mutáció: TP53, c.376-2A>T, Splice akceptor mutáció

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820700a); 1:1 keverék
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 2% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
0,6–1,2 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
58 év
Etnikai hovatartozás
Japán