Mine otse sisu juurde
KYSE520
Kude
Söögitoru
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumendid

KYSE520

Cell line · Toote number 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KYSE520 rakuliin on inimese söögitoru lamerakk-kartsinoomi (ESCC) mudel, mis on saadud primaarsest kasvajast. See on mõõdukalt diferentseerunud ja on olnud oluline epiteeli-mesenhümaalse plastilisuse (EMP) uurimisel söögitoruvähi puhul. KYSE520 rakud on heterogeensed, koosnedes nii epiteelilaadsetest (CD44v+) kui ka mesenhüümilaadsetest (CD44v-) alampopulatsioonidest. Need kaks populatsiooni on võimelised omavahel muutuma, mis peegeldab dünaamilist EMP protsessi. See omadus muudab KYSE520 suurepäraseks mudeliks vähi tüvirakkude omaduste ja keemiaresetentsuse mehhanismide uurimiseks ESCC-s.

Geneetiliselt on KYSE520 rakkudel märkimisväärne epigeneetiline regulatsioon. Kasvaja supressoriks oleva JAM3 geeni promootorpiirkond on neis rakkudes mittemetüülitud, võimaldades selle ekspressiooni. JAM3 mängib rolli rakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsuse reguleerimisel Wnt/β-kateniini signalisatsiooni kaudu. JAM3 ekspressiooni säilitamine KYSE520-s on seotud agressiivse vähi fenotüübi allasurumisega.

Terapeutilistes uuringutes on KYSE520 rakke kasutatud fibroblastide kasvufaktori sarnase retseptori 1 (FGFRL1) rolli uurimiseks. Uuringud on näidanud, et FGFRL1 puudulikud KYSE520 rakud näitavad vähenenud kasvajate kasvu ja liikuvust ning vähenenud maatriksi metalloproteinaas-1 (MMP-1) ja fibroblastide kasvufaktorit siduvate valkude 1 (FGFBP1) ekspressiooni. Need leiud rõhutavad FGFRL1 tähtsust kasvajate tekkimisel ja viitavad potentsiaalsetele terapeutilistele sihtmärkidele. Lisaks annavad EMP dünaamika ja sellega seotud molekulaarradad KYSE520 rakkudes ülevaate ESCC progresseerumisest ja resistentsuse mehhanismidest, mis aitab kaasa sihipärase ravi väljatöötamisele.

Kude
Söögitoru
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
KYSE520 (Cytioni katalooginumber 305449)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Onkogeenid
TP53, MYC
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, c.376-2A>T, splaissinguaktseptori mutatsioon: TP53, c.376-2A>T, splaissinguaktseptori mutatsioon

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikli number 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikli number 820700a); 1:1 segu
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 2% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
0,6–1,2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
58 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani