Gå direkte til indholdet
KYSE180
Væv
Spiserør
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumenter

KYSE180

Cell line · Varenummer 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KYSE180-cellelinjen er en model for pladecellekarcinom i spiserøret (ESCC) hos mennesker, der stammer fra en primær tumor. Denne cellelinje klassificeres som moderat differentieret og udviser en række genetiske ændringer, der er karakteristiske for ESCC, herunder mutationer i NRF2 (NFE2L2)-signalvejen. Mere specifikt bærer KYSE180-celler NRF2 D77V-mutationen, som bidrager til hyperaktivering af NRF2, en transkriptionsfaktor, der er involveret i responsen på oxidativt stress og tumorprogression.

KYSE180-celler anvendes i vid udstrækning til at undersøge de molekylære mekanismer bag ESCC, herunder kemoresistens og onkogen signalering. Forhøjet NRF2-aktivitet i KYSE180-celler er blevet knyttet til resistens over for kemoterapi og strålebehandling, da NRF2 styrker cellernes antioxidante forsvar og metaboliske tilpasninger. Nyere forskning har identificeret forbindelser som pyrimethamin, der hæmmer NRF2-signalering, hvilket resulterer i nedsat proliferation og tumorigenicitet hos KYSE180-celler. Sådanne studier fremhæver det terapeutiske potentiale ved at målrette behandlingen mod NRF2 i kræftformer med højt NRF2-niveau.

Derudover er KYSE180-celler blevet anvendt til at evaluere rollen af enzymerne i aldo-keto-reduktase (AKR)-familien, især AKR1C1 og AKR1C2, i lægemiddelmetabolisme og kemoprævention. Ekspressionen af disse enzymer er opreguleret i KYSE180-celler, hvilket øger følsomheden over for stoffer som ethyl-3,4-dihydroxybenzoat (EDHB). Dette stof inducerer apoptose og autofagi, hvilket demonstrerer cellelinjens anvendelighed i undersøgelsen af lægemiddelresponser og cellulære stressmekanismer i ESCC.

Væv
Spiserør
Sygdom
Pladecellekarcinom
Synonymer
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
MSI-status
Stabil (MSS)

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KYSE180 (Cytion-katalognummer 305450)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2–4 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
2 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
53 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk