Przejdź do treści
KYSE180
Chusteczka
Przełyk
Choroba
Rak płaskonabłonkowy
Synonimy
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumenty

KYSE180

Cell line · Numer produktu 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa KYSE180 stanowi model ludzkiego raka płaskonabłonkowego przełyku (ESCC) wyhodowany z guza pierwotnego. Linia ta zaliczana jest do komórek umiarkowanie zróżnicowanych i wykazuje szereg zmian genetycznych charakterystycznych dla ESCC, w tym mutacje w szlaku sygnałowym NRF2 (NFE2L2). W szczególności komórki KYSE180 zawierają mutację NRF2 D77V, która przyczynia się do nadmiernej aktywacji NRF2 – czynnika transkrypcyjnego biorącego udział w odpowiedzi na stres oksydacyjny oraz progresji nowotworu.

Komórki KYSE180 są szeroko stosowane do badania mechanizmów molekularnych ESCC, w tym oporności na chemioterapię i sygnalizacji onkogennej. Podwyższona aktywność NRF2 w komórkach KYSE180 została powiązana z opornością na chemioterapię i radioterapię, ponieważ NRF2 wzmacnia komórkowe mechanizmy obronne przed utlenianiem oraz adaptacje metaboliczne. W ostatnich badaniach zidentyfikowano związki, takie jak pirymetamina, które hamują sygnalizację NRF2, co skutkuje zmniejszeniem proliferacji i nowotworowości komórek KYSE180. Badania te podkreślają potencjał terapeutyczny ukierunkowania na NRF2 w nowotworach o wysokim poziomie NRF2.

Ponadto komórki KYSE180 wykorzystano do oceny roli rodziny enzymów aldo-keto reduktaz (AKR), a w szczególności AKR1C1 i AKR1C2, w metabolizmie leków i chemoprewencji. Ekspresja tych enzymów jest zwiększona w komórkach KYSE180, co zwiększa wrażliwość na takie czynniki, jak 3,4-dihydroksybenzoesan etylu (EDHB). Związek ten indukuje apoptozę i autofagię, co świadczy o przydatności tej linii komórkowej w badaniu reakcji na leki oraz mechanizmów stresu komórkowego w raku przełyku (ESCC).

Chusteczka
Przełyk
Choroba
Rak płaskonabłonkowy
Synonimy
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Stan MSI
Stabilny (MSS)

04Identyfikatory

Źródło
KYSE180 (numer katalogowy Cytion 305450)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozygotyczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2–4 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
53 lata
Pochodzenie etniczne
Japoński