الانتقال إلى المحتوى
KYSE180
الأنسجة
المريء
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

المستندات

KYSE180

Cell line · رقم المنتج 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا KYSE180 هي نموذج لسرطان الخلايا الحرشفية في المريء البشري (ESCC) مستمد من ورم أولي. تُصنف هذه السلسلة الخلوية على أنها متوسطة التمايز، وتُظهر مجموعة من التغيرات الجينية المميزة لسرطان الخلايا الحرشفية في المريء، بما في ذلك طفرات في مسار إشارات NRF2 (NFE2L2). وعلى وجه التحديد، تحمل خلايا KYSE180 طفرة NRF2 D77V، التي تساهم في فرط تنشيط NRF2، وهو عامل نسخ يشارك في الاستجابة للإجهاد التأكسدي وتطور الورم.

تُستخدم خلايا KYSE180 على نطاق واسع لدراسة الآليات الجزيئية لسرطان المريء الحرشفية الخلايا (ESCC)، بما في ذلك مقاومة العلاج الكيميائي والإشارات المسببة للأورام. وقد تم ربط ارتفاع نشاط NRF2 في خلايا KYSE180 بمقاومة العلاج الكيميائي والعلاج الإشعاعي، حيث يعزز NRF2 الدفاعات المضادة للأكسدة الخلوية والتكيفات الأيضية. وقد حددت الأبحاث الحديثة مركبات مثل البيريميثامين التي تثبط إشارات NRF2، مما يؤدي إلى انخفاض تكاثر خلايا KYSE180 وقدرتها على تكوين الأورام. وتسلط هذه الدراسات الضوء على الإمكانات العلاجية لاستهداف NRF2 في الأورام التي ترتفع فيها مستويات NRF2.

بالإضافة إلى ذلك، استُخدمت خلايا KYSE180 لتقييم أدوار عائلة إنزيمات ألدو-كيتو ريدوكتاز (AKR)، ولا سيما AKR1C1 وAKR1C2، في استقلاب الأدوية والوقاية الكيميائية. يتم تنظيم التعبير عن هذه الإنزيمات بشكل زائد في خلايا KYSE180، مما يعزز الحساسية تجاه عوامل مثل إيثيل-3،4-ديهيدروكسي بنزوات (EDHB). يحفز هذا المركب موت الخلايا المبرمج (الأبوبتوسيس) والالتهام الذاتي (الأوتوفاجي)، مما يبرهن على فائدة خط الخلايا هذا في استكشاف استجابات الأدوية وآليات الإجهاد الخلوي في سرطان المريء (ESCC).

الأنسجة
المريء
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
حالة MSI
مستقر (MSS)

04المعرّفات

المرجع
KYSE180 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305450)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1349

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: TP53، p.Ile195Thr (c.584T>C)، متماثل

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
2-4*10^4/سم²
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
53 سنة
الأصل العرقي
ياباني