Gå direkte til indholdet
KYSE-30
Væv
Spiserørets pladeepitel
Sygdom
Pladecellecarcinom i spiserøret
Synonymer
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Dokumenter

KYSE-30

Cell line · Varenummer 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KYSE-30 er en veldifferentieret human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cellelinje, der stammer fra en primær tumor hos en voksen patient. Som en del af KYSE-serien blev denne cellelinje etableret for at studere de molekylære og cellulære egenskaber ved spiserørskræft. KYSE-30-celler er bemærkelsesværdige for deres hurtige spredning med en fordoblingstid på 20,8 timer, hvilket gør dem til en robust model for in vitro-cancerforskning. Disse celler vokser overvejende som klæbende monolag og har en karakteristisk polygonal form og et ensartet udseende under fasekontrastmikroskopi. Deres vækstmønster er typisk for epiteliale kræftceller, der danner tætpakkede kolonier med en tendens til at hobe sig op på en uorganiseret måde, hvilket afspejler den invasive karakter af den tumor, de stammer fra.

Genetisk set er KYSE-30 signifikant for sine ændringer i vigtige tumorundertrykkende gener. Cellelinjen udviser en vildtype-konfiguration for p16 (INK4a)- og p15 (INK4b)-generne, men den bærer en bemærkelsesværdig punktmutation i p16-genet, der resulterer i et for tidligt stopcodon, hvilket fører til et afkortet, ikke-funktionelt protein. Denne mutation bidrager sandsynligvis til tabet af cellecykluskontrol og fremmer den ukontrollerede spredning, der er karakteristisk for kræftceller. Bevarelsen af wild-type p15-genet tyder dog på, at ændringer i p16-genet spiller en mere kritisk rolle i onkogenesen af KYSE-30, hvilket kan være relevant i undersøgelser, der fokuserer på disse geners forskellige roller i kræft.

KYSE-30 er tumorigen, hvilket fremgår af dens evne til at danne tumorer, når den injiceres i athymiske nøgenmus, hvilket gør den til en fremragende model for in vivo-undersøgelser af ESCC. Den histologiske undersøgelse af tumorer dannet af KYSE-30-celler viser egenskaber, der svarer til det oprindelige pladecellekarcinom, hvilket giver en troværdig repræsentation af sygdommen. Denne cellelinje er uvurderlig til forskning i mekanismerne for tumorigenese, de genetiske og epigenetiske ændringer, der driver spiserørskræft, og udviklingen af målrettede terapier, selvom den ikke er egnet til terapeutiske eller in vivo-anvendelser.

Væv
Spiserørets pladeepitel
Sygdom
Pladecellecarcinom i spiserøret
Synonymer
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende, med lang pseudopod
Fordoblingstid
20 til 30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KYSE-30 (Cytion-katalognummer 305094)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Bland venligst Ham's F12 og RPMI 1640 i forholdet 50:50 (Cytion artikelnummer 820600a og 820702a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
64 år
Etnisk tilhørsforhold
Asiatisk