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RPMI 8226
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Multiples Myelom
Synonyme
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RPMI 8226

Cell line · Artikelnummer 300431

RPMI 8226 cells are a human myeloma cell line that was established in 1966 from the peripheral blood of a 61-year-old male patient with multiple myeloma. ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

RPMI 8226-Zellen sind eine menschliche Myelom-Zelllinie, die 1966 aus dem peripheren Blut eines 61-jährigen männlichen Patienten mit multiplem Myelom hergestellt wurde. Diese Zelllinie wurde nach dem Roswell Park Memorial Institute (RPMI) benannt, wo sie entwickelt wurde, und die Nummer 8226 bezeichnet ihre spezifische Katalognummer in der Zellbank.

Die Zelllinie RPMI 8226 ist ein wichtiges Modellsystem für die Erforschung des Multiplen Myeloms und verwandter Aspekte der Plasmazellbiologie, der immunologischen Forschung und der Krebstherapie. RPMI 8226-Zellen sind dafür bekannt, dass sie leichte Kappa-Ketten von Immunglobulinen produzieren und sezernieren, eine Eigenschaft, die häufig in Forschungsstudien genutzt wird, um die Mechanismen der Antikörperproduktion und -sekretion zu untersuchen.

RPMI 8226-Zellen weisen zahlreiche Chromosomenanomalien auf, die typisch für multiple Myelomzellen sind. Dazu gehören Translokationen, Deletionen und Amplifikationen, die verschiedene Onkogene und Tumorsuppressor-Gene betreffen.

Die menschliche Myelom-Zelllinie RPMI 8226 wird häufig in der Arzneimittelforschung und -entwicklung eingesetzt und dient der Untersuchung von Resistenzmechanismen und der Bewertung von Kombinationstherapien.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die RPMI 8226-Zellen ein wichtiges In-vitro-Modell für die Erforschung des Multiplen Myeloms darstellen, das die Untersuchung der biologischen und molekularen Mechanismen, die dieser Krankheit zugrunde liegen, und die Entwicklung von therapeutischen Strategien ermöglicht.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Multiples Myelom
Synonyme
  • RPMI-8226
  • RPMI.8226
  • RPMI8226
  • RPMI no. 8226
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  • RPMI8226/S
  • 8226/S
  • Roswell Park Memorial Institute 8226
  • GM02132
  • GM2132
  • GM 2132
  • GM02132C
  • Simpson

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen

04Bezeichner

Quellenangabe
RPMI 8226 (Cytion Katalognummer 300431)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0014

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
HLA Aw19, B15, B37, Cw2
Isoenzyme
G6PD, A
Reverse Transkriptase
Negativ
Produkte
Leichte Kette des Immunglobulins

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen.
Aussaatdichte
Beginnen Sie neue Kulturen mit 5 x 105 lebensfähigen Zellen/ml. Subkultivieren Sie bei 1-2 x 106 Zellen/ml. Die maximale Zelldichte liegt bei 1-2 x 106 Zellen/ml.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Lassen Sie die Zellen nach dem Auftauen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
61 Jahre