Mine otse sisu juurde
RPMI 8226
Kude
Perifeerne veri
Haigus
Müeloomi paljunemine
Sünonüümid
RPMI-8226, RPMI.8226, RPMI8226, RPMI no. 8226, RPMI no 8226, RPMI #8226, 8226, RPMI 8226/S, RPMI-8226S, RPMI8226/S, 8226/S, Roswell Park Memorial Institute 8226, GM02132, GM2132, GM 2132, GM02132C, Simpson

Dokumendid

RPMI 8226

Cell line · Toote number 300431

RPMI 8226 cells are a human myeloma cell line that was established in 1966 from the peripheral blood of a 61-year-old male patient with multiple myeloma. ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

RPMI 8226 rakud on inimese müeloomi rakuliin, mis loodi 1966. aastal 61-aastase, hulgimüeloomi põdeva meessoost patsiendi perifeersest verest. See rakuliin sai oma nime Roswell Park Memorial Institute'i (RPMI) järgi, kus see välja töötati, ja number 8226 tähistab selle konkreetset katalooginumbrit rakupangas.

RPMI 8226 rakuliin on oluline mudelisüsteem hulgimüeloomi ja sellega seotud plasmarakkude bioloogia, immunoloogiliste uuringute ja vähiravi aspektide uurimiseks. RPMI 8226 rakud toodavad ja eritavad teadaolevalt immunoglobuliinide kappa kerget ahelat, mida kasutatakse sageli teadusuuringutes antikehade tootmise ja sekretsiooni mehhanismide uurimiseks.

RPMI 8226 rakkudel on arvukalt kromosoomianomaaliaid, mis on tüüpilised hulgimüeloomi rakkudele. Nende hulka kuuluvad translokatsioonid, deletsioonid ja amplifikatsioonid, mis mõjutavad mitmesuguseid onkogeene ja kasvajasupressorgeene.

Inimese müeloomi rakuliini RPMI 8226 kasutatakse laialdaselt ravimite uurimis- ja arendusuuringutes ning seda on kasutatud ravimresistentsuse radade uurimiseks ja kombinatsiooniteraapiate hindamiseks.

Kokkuvõttes pakuvad RPMI 8226 rakud kriitilist in vitro mudelit hulgimüeloomi uurimiseks, mis võimaldab uurida selle haiguse aluseks olevaid bioloogilisi ja molekulaarseid mehhanisme ning töötada välja ravistrateegiaid.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
Müeloomi paljunemine
Sünonüümid
  • RPMI-8226
  • RPMI.8226
  • RPMI8226
  • RPMI no. 8226
  • RPMI no 8226
  • RPMI #8226
  • 8226
  • RPMI 8226/S
  • RPMI-8226S
  • RPMI8226/S
  • 8226/S
  • Roswell Park Memorial Institute 8226
  • GM02132
  • GM2132
  • GM 2132
  • GM02132C
  • Simpson

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud

04Tunnused

Viide
RPMI 8226 (Cytioni katalooginumber 300431)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0014

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA Aw19, B15, B37, Cw2
Isoensüümid
G6PD, A
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Immunoglobuliini kerge ahel

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
Alustage uusi kultuure 5 x 105 eluvõimelise rakuga/ml. Subkultuur 1-2 x 106 rakuga/ml. Maksimaalne rakutihedus on 1-2 x 106 rakku/ml.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist laske rakkudel vähemalt 24 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
61 aastat