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RPMI 8226
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Mieloma multiplo
Sinonimi
RPMI-8226, RPMI.8226, RPMI8226, RPMI no. 8226, RPMI no 8226, RPMI #8226, 8226, RPMI 8226/S, RPMI-8226S, RPMI8226/S, 8226/S, Roswell Park Memorial Institute 8226, GM02132, GM2132, GM 2132, GM02132C, Simpson

Documenti

RPMI 8226

Cell line · Codice prodotto 300431

RPMI 8226 cells are a human myeloma cell line that was established in 1966 from the peripheral blood of a 61-year-old male patient with multiple myeloma. ...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule RPMI 8226 sono una linea cellulare umana di mieloma creata nel 1966 dal sangue periferico di un paziente maschio di 61 anni affetto da mieloma multiplo. Questa linea cellulare prende il nome dal Roswell Park Memorial Institute (RPMI) in cui è stata sviluppata e il numero 8226 indica il suo specifico numero di catalogo nella banca delle cellule.

La linea cellulare RPMI 8226 è un importante sistema modello per lo studio del mieloma multiplo e degli aspetti correlati della biologia delle plasmacellule, della ricerca immunologica e della terapia del cancro. Le cellule RPMI 8226 sono note per produrre e secernere le catene leggere kappa delle immunoglobuline, una caratteristica che viene spesso sfruttata negli studi di ricerca per studiare i meccanismi di produzione e secrezione degli anticorpi.

Le cellule RPMI 8226 presentano numerose anomalie cromosomiche, tipiche delle cellule di mieloma multiplo. Queste includono traslocazioni, delezioni e amplificazioni che interessano vari oncogeni e geni soppressori del tumore.

Le linee cellulari di mieloma umano RPMI 8226 sono ampiamente utilizzate nella ricerca per la scoperta e lo sviluppo di farmaci e sono state impiegate per studiare le vie di resistenza ai farmaci e valutare le terapie di combinazione.

In sintesi, le cellule RPMI 8226 rappresentano un modello in vitro fondamentale per la ricerca sul mieloma multiplo, consentendo di studiare i meccanismi biologici e molecolari alla base di questa malattia e di sviluppare strategie terapeutiche.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Mieloma multiplo
Sinonimi
  • RPMI-8226
  • RPMI.8226
  • RPMI8226
  • RPMI no. 8226
  • RPMI no 8226
  • RPMI #8226
  • 8226
  • RPMI 8226/S
  • RPMI-8226S
  • RPMI8226/S
  • 8226/S
  • Roswell Park Memorial Institute 8226
  • GM02132
  • GM2132
  • GM 2132
  • GM02132C
  • Simpson

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RPMI 8226 (catalogo Cytion numero 300431)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0014

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
HLA Aw19, B15, B37, Cw2
Isoenzimi
G6PD, A
Trascriptasi inversa
Negativo
Prodotti
Catena leggera dell'immunoglobulina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Avviare nuove colture a 5 x 105 cellule vitali/ml. Effettuare la subcoltura a 1-2 x 106 cellule/ml. La densità cellulare massima è di 1-2 x 106 cellule/ml.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
61 anni