Pāriet uz saturu
RPMI 8226
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
RPMI-8226, RPMI.8226, RPMI8226, RPMI no. 8226, RPMI no 8226, RPMI #8226, 8226, RPMI 8226/S, RPMI-8226S, RPMI8226/S, 8226/S, Roswell Park Memorial Institute 8226, GM02132, GM2132, GM 2132, GM02132C, Simpson

Dokumenti

RPMI 8226

Cell line · Preces numurs 300431

RPMI 8226 cells are a human myeloma cell line that was established in 1966 from the peripheral blood of a 61-year-old male patient with multiple myeloma. ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

RPMI 8226 šūnas ir cilvēka mielomas šūnu līnija, kas tika izveidota 1966. gadā no 61 gadu veca vīrieša, kurš bija slims ar multiplo mielomu, perifērajām asinīm. Šī šūnu līnija tika nosaukta pēc Roswell Park Memorial Institute (RPMI), kur tā tika izstrādāta, un numurs 8226 apzīmē tās konkrēto kataloga numuru šūnu bankā.

RPMI 8226 šūnu līnija ir svarīga modeļa sistēma, lai pētītu multiplo mielomu un ar to saistītos plazmatisko šūnu bioloģijas, imunoloģijas pētījumu un vēža terapijas aspektus. Ir zināms, ka RPMI 8226 šūnas ražo un izdala imūnglobulīnu kappa vieglās ķēdes, un šo īpašību bieži izmanto pētījumos, lai izpētītu antivielu ražošanas un izdalīšanas mehānismus.

RPMI 8226 šūnām ir daudz hromosomu anomāliju, kas raksturīgas multiplās mielomas šūnām. Tās ietver translokācijas, delecijas un amplifikācijas, kas ietekmē dažādus onkogēnus un audzēja supresoru gēnus.

Cilvēka mielomas šūnu līnija RPMI 8226 tiek plaši izmantota zāļu atklāšanas un izstrādes pētījumos, un to izmanto, lai pētītu zāļu rezistences ceļus un novērtētu kombinētās terapijas.

Kopumā RPMI 8226 šūnas ir ļoti svarīgs in vitro modelis multiplās mielomas pētījumiem, kas ļauj izpētīt šīs slimības bioloģiskos un molekulāros mehānismus un izstrādāt terapeitiskās stratēģijas.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
  • RPMI-8226
  • RPMI.8226
  • RPMI8226
  • RPMI no. 8226
  • RPMI no 8226
  • RPMI #8226
  • 8226
  • RPMI 8226/S
  • RPMI-8226S
  • RPMI8226/S
  • 8226/S
  • Roswell Park Memorial Institute 8226
  • GM02132
  • GM2132
  • GM 2132
  • GM02132C
  • Simpson

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas

04Identifikatori

Atsauce
RPMI 8226 (Cytion kataloga numurs 300431)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0014

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA Aw19, B15, B37, Cw2
Izoenzīmi
G6PD, A
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Imunoglobulīna vieglā ķēde

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
Sāciet jaunas kultūras ar 5 x 105 dzīvotspējīgām šūnām/ml. Veiciet subkultūru ar 1-2 x 106 šūnām/ml. Maksimālais šūnu blīvums ir 1-2 x 106 šūnas/ml.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas ļaujiet šūnām vismaz 24 stundas atgūties no sasaldēšanas procesa.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
61 gads