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SCaBER
Gewebe
Harnblase
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Harnblase
Synonyme
SCABER, Scaber

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SCaBER

Cell line · Artikelnummer 305111

The SCaBER cell line is derived from a human squamous cell carcinoma of the urinary bladder. Originating from a 58-year-old male patient, this cell line r...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die SCaBER-Zelllinie wurde aus einem menschlichen Plattenepithelkarzinom der Harnblase gewonnen. Diese Zelllinie stammt von einem 58-jährigen männlichen Patienten und weist viele Merkmale des ursprünglichen Tumors auf, einschließlich seiner Plattenepithel-Differenzierung. SCaBER-Zellen weisen eine ausgeprägte epitheliale Morphologie mit ausgeprägten interzellulären Verbindungen wie Desmosomen und interdigitalen Mikrovilli auf. Diese Merkmale machen sie zu einem hervorragenden Modell für die Untersuchung der Pathologie und des Fortschreitens von Plattenepithelkarzinomen in der Blase.

SCaBER-Zellen weisen einen hypotetraploiden Karyotyp mit einer sehr variablen Chromosomenzahl und dem Vorhandensein markanter Markerchromosomen auf. Der männliche Karyotyp umfasst sowohl X- als auch Y-Chromosomen, was ihn weiter von anderen Zelllinien unterscheidet. Ultrastrukturelle Untersuchungen zeigen reichlich Tonofilamente, Lipidkörper und gut entwickelte Organellen wie den Golgi-Apparat und das raue endoplasmatische Retikulum. Diese Eigenschaften wurden über mehrere Passagen hinweg beibehalten, so dass die Konsistenz für Langzeitstudien gewährleistet ist.

Diese Zelllinie wurde in der immunologischen Forschung eingesetzt, um tumorspezifische Antigene und ihre Rolle beim Fortschreiten von Blasenkrebs zu untersuchen. Die Plattenepithel-Differenzierung von SCaBER ist ein Schlüsselfaktor für die Erforschung tumorassoziierter Antigene in Plattenepithelkarzinomen und bietet Einblicke in potenzielle diagnostische Marker und therapeutische Ziele. Seine gut charakterisierten molekularen und phänotypischen Eigenschaften machen es zu einer wichtigen Ressource für die urologische Krebsforschung.

Gewebe
Harnblase
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Harnblase
Synonyme
  • SCABER
  • Scaber

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
SCaBER (Cytion Katalognummer 305111)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_3599

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
58 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Afrika