Siirry sisältöön
SCaBER
Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Virtsarakon levyepiteelisyöpä
Synonyymit
SCABER, Scaber

Asiakirjat

SCaBER

Cell line · Tuotenumero 305111

The SCaBER cell line is derived from a human squamous cell carcinoma of the urinary bladder. Originating from a 58-year-old male patient, this cell line r...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SCaBER-solulinja on peräisin ihmisen virtsarakon levyepiteelisolusyövästä. Solulinja on peräisin 58-vuotiaalta miespotilaalta, ja siinä on säilynyt monia alkuperäisen kasvaimen piirteitä, mukaan luettuna sen levyepiteelimäinen erilaistuminen. SCaBER-soluilla on selvä epiteelimorfologia, jossa on selviä solujen välisiä yhteyksiä, kuten desmosomeja ja toisiinsa kiinnittyneitä mikrovilloja. Nämä ominaisuudet tekevät siitä erinomaisen mallin virtsarakon okasolusyövän patologian ja etenemisen tutkimiseen.

SCaBER-soluilla on hypotetraploidinen karyotyyppi, jossa kromosomiluku vaihtelee suuresti ja jossa esiintyy erottuvia merkkikromosomeja. Uroksen karyotyyppi sisältää sekä X- että Y-kromosomeja, mikä erottaa sen edelleen muista solulinjoista. Ultrastruktuuritutkimukset paljastavat runsaasti tonofilamentteja, lipidikappaleita ja hyvin kehittyneitä organelleja, kuten Golgin laitteisto ja karkea endoplasminen retikulum. Nämä ominaisuudet ovat säilyneet useiden läpikäyntien aikana, mikä takaa johdonmukaisuuden pitkäaikaistutkimuksia varten.

Tätä solulinjaa on hyödynnetty immunologisessa tutkimuksessa, jossa on tutkittu kasvainspesifisiä antigeenejä ja niiden merkitystä virtsarakon syövän etenemisessä. SCaBER:n levyepiteelin erilaistuminen on avaintekijä levyepiteelisolusyöpien kasvaimiin liittyvien antigeenien tutkimuksissa, mikä tarjoaa tietoa mahdollisista diagnostisista merkkiaineista ja terapeuttisista kohteista. Sen hyvin karakterisoidut molekyyli- ja fenotyyppiset ominaisuudet tekevät siitä kriittisen resurssin urologisen syövän tutkimuksessa.

Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Virtsarakon levyepiteelisyöpä
Synonyymit
  • SCABER
  • Scaber

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
SCaBER (Cytionin tuotenumero 305111)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_3599

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
58 vuotta
Etnisyys
Afrikkalainen