Pāriet uz saturu
SCaBER
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Plakanšūnu karcinoma urīnpūslī
Sinonīmi
SCABER, Scaber

Dokumenti

SCaBER

Cell line · Preces numurs 305111

The SCaBER cell line is derived from a human squamous cell carcinoma of the urinary bladder. Originating from a 58-year-old male patient, this cell line r...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SCaBER šūnu līnija ir iegūta no cilvēka urīnpūšļa plakanšūnu karcinomas. Šai šūnu līnijai, kas iegūta no 58 gadus veca vīrieša, ir saglabājušās daudzas sākotnējā audzēja pazīmes, tostarp plakanšūnu diferenciācija. SCaBER šūnām ir izteikta epitēlija morfoloģija ar izteiktiem starpšūnu savienojumiem, piemēram, desmosomām un savstarpēji izkliedētiem mikroviliem. Šīs īpašības padara to par lielisku modeli urīnpūšļa plakanšūnu karcinomas patoloģijas un progresēšanas izpētei.

SCaBER šūnām ir hipotetraploīds kariotips ar ļoti mainīgu hromosomu skaitu un raksturīgām marķieru hromosomām. Vīriešu kariotipā ir gan X, gan Y hromosomas, kas to vēl vairāk atšķir no citām šūnu līnijām. Ultrastrukturālie pētījumi atklāj bagātīgus tonofilamentus, lipīdu ķermenīšus un labi attīstītas organellas, piemēram, Golgi aparātu un raupjo endoplazmas retikulu. Šīs īpašības ir saglabājušās vairākkārt, nodrošinot konsekvenci ilgtermiņa pētījumiem.

Šī šūnu līnija ir izmantota imunoloģiskajos pētījumos, lai izpētītu audzējam specifiskus antigēnus un to lomu urīnpūšļa vēža progresēšanā. SCaBER plakanšūnu diferenciācija ir galvenais faktors, lai pētītu ar audzēju saistītos antigēnus plakanšūnu karcinomos, kas sniedz ieskatu par potenciālajiem diagnostikas marķieriem un terapeitiskajiem mērķiem. Tās labi raksturotās molekulārās un fenotipiskās īpašības padara to par kritiski svarīgu resursu uroloģisko vēža pētījumu jomā.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Plakanšūnu karcinoma urīnpūslī
Sinonīmi
  • SCABER
  • Scaber

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
SCaBER (Cytion kataloga numurs 305111)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_3599

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
58 gadi
Etniskā piederība
Āfrikas