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SNU-81
Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
SNU81, NCI-SNU-81

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SNU-81

Cell line · Artikelnummer 305638

The SNU-81 cell line is a human colorectal carcinoma model established from a Korean patient. It is part of a collection of 12 colorectal cancer cell line...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie SNU-81 ist ein menschliches Darmkrebsmodell, das von einem koreanischen Patienten stammt. Sie ist Teil einer Sammlung von 12 Kolorektalkarzinom-Zelllinien, die sowohl von Primärtumoren als auch von Metastasen stammen und die Tumorbiologie auf vielfältige Weise repräsentieren. SNU-81 wurde aus einem primären kolorektalen Adenokarzinom gewonnen und weist eine epitheliale Morphologie mit adhärentem Wachstum in Kultur auf. Die Zelllinie exprimiert carcinoembryonales Antigen (CEA), das in den Kulturüberstand sezerniert wird, was typische kolorektale Tumoreigenschaften widerspiegelt.

Auf molekularer Ebene wurde SNU-81 einer umfassenden genetischen Charakterisierung unterzogen. Es weist eine Mutation im TP53-Tumorsuppressor-Gen auf, ein häufiges Ereignis in der kolorektalen Karzinogenese, das typischerweise mit späteren Stadien der Tumorprogression assoziiert ist. Darüber hinaus wurden Mutationen im APC-Gen festgestellt, was auf eine Störung der Wnt/β-Catenin-Signalübertragung hindeutet, die ein Kennzeichen der Darmkrebsentwicklung ist. Im K-ras2-Gen wurden bei dieser Linie keine aktivierenden Mutationen festgestellt. Es wurden auch Veränderungen bei Zellzyklusregulatoren, wie z. B. eine Hypermethylierung des p16-Gens, beobachtet, was die Nützlichkeit der Zelllinie bei der Untersuchung genetischer und epigenetischer Mechanismen, die Darmkrebs auslösen, weiter unterstützt. Insgesamt dient SNU-81 als gut definiertes In-vitro-Modell für die Erforschung der Funktion von Tumorsuppressorgenen, der Regulierung onkogener Signalwege und der Reaktion auf gezielte Therapien in der Darmkrebsforschung.

Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • SNU81
  • NCI-SNU-81

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelial
Verdopplungszeit
30 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
SNU-81 (Cytion-Katalognummer 305638)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_5098

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: APC, Einfach, p.Ser1392Ter (c.4175C>A), Heterozygot; Mutation: APC, Einfach, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), Heterozygot; Mutation: APC, Einfach, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), Heterozygot; Mutation: FBXW7, Einfach, p.Arg479Gln (c.1436G>A), Heterozygot; Mutation: KRAS, Einfach, p.Ala146Thr (c.436G>A), Heterozygot; Mutation: PTEN, Einfach, p.Arg130Gln (c.389G>A), Heterozygot; Mutation: PTEN, Einfach, p.Glu299Ter (c.895G>T), Heterozygot; Mutation: TBX3, Einfach, p.Glu111Ter (c.331G>T), Heterozygot; Mutation: TBX3, Einfach, c.942-1G>T, Heterozygot; Mutation: TP53, Einfach, p.Lys132Thr (c.395A>C), Heterozygot; Mutation: TP53, Einfach, p.Arg213Ter (c.637C>T), heterozygot; Mutation: TP53, Einfach, p.Arg213Ter (c.637C>T), heterozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Medium entfernen, frische 0,25 %ige Trypsin- und 0,02 %ige EDTA-Lösung zugeben, den Kulturkolben 3 bis 5 Minuten bei 37''''C stehen lassen, Nährmedium zugeben und die Zellen sammeln, das Medium in ein 15-ml-Röhrchen überführen, zentrifugieren, das Medium absaugen, die Pellets mit Nährmedium resuspendieren und in den Kulturkolben geben
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
53 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Koreanisch