Přejít na obsah
SNU-81
Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
SNU81, NCI-SNU-81

Dokumenty

SNU-81

Cell line · Číslo výrobku 305638

The SNU-81 cell line is a human colorectal carcinoma model established from a Korean patient. It is part of a collection of 12 colorectal cancer cell line...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SNU-81 je model lidského kolorektálního karcinomu vytvořený na základě korejského pacienta. Je součástí sbírky 12 buněčných linií kolorektálního karcinomu odvozených z primárních nádorů i metastatických ložisek, které poskytují rozmanité zastoupení biologie nádorů. SNU-81 byla odvozena z primárního kolorektálního adenokarcinomu a vykazuje epiteliální morfologii s adherentním růstem v kultuře. Buněčná linie exprimuje karcinoembryonální antigen (CEA), který je vylučován do kultivačního supernatantu, což odráží typické vlastnosti kolorektálního nádoru.

Na molekulární úrovni byla SNU-81 podrobena rozsáhlé genetické charakterizaci. Obsahuje mutaci v nádorovém supresorovém genu TP53, což je běžná událost v kolorektální karcinogenezi, typicky spojená s pozdějšími stádii progrese nádoru. Kromě toho byly identifikovány mutace v genu APC, což naznačuje narušení signalizace Wnt/β-katenin, která je charakteristickým znakem vývoje kolorektálního karcinomu. U této linie nebyly zjištěny žádné aktivační mutace v genu K-ras2. Byly rovněž pozorovány změny v regulátorech buněčného cyklu, jako je hypermetylace genu p16, což dále podporuje užitečnost buněčné linie při studiu genetických a epigenetických mechanismů, které jsou příčinou vzniku kolorektálního karcinomu. Celkově lze říci, že SNU-81 slouží jako dobře definovaný in vitro model pro zkoumání funkce nádorových supresorových genů, regulace onkogenních drah a odpovědi na cílenou terapii ve výzkumu kolorektálního karcinomu.

Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • SNU81
  • NCI-SNU-81

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové
Doba zdvojnásobení
30 hodin

04Identifikátory

Citace
SNU-81 (katalogové číslo Cytion 305638)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5098

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: (c.4175C>A), heterozygotní; Mutace: APC, jednoduchá, p.Ser1392Ter (c.4175C>A): Arg1450Ter (c.4348C>T), heterozygotní; mutace: APC, Simple, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), heterozygotní; mutace: APC, Simple, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), heterozygotní: (c.6610C>T), heterozygotní; mutace: APC, Simple, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), heterozygotní: FBXW7, jednoduchá, p.Arg479Gln (c.1436G>A), heterozygotní; mutace: KRAS, jednoduchá, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozygotní; mutace: KRAS, jednoduchá, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozygotní: PTEN, jednoduchá, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterozygotní; mutace: KRAS, jednoduchá, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterozygotní: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterozygotní; Mutace: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterozygotní; Mutace: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterozygotní: TBX3, jednoduchá, p.Glu111Ter (c.331G>T), heterozygotní; mutace: TBX3, Simple, c.942-1G>T, heterozygotní; Mutace: TBX3, Simple, c.942-1G>T, heterozygotní; Mutace: TBX3, Simple, c.942-1G>T, heterozygotní: TP53, jednoduchá, p.Lys132Thr (c.395A>C), heterozygotní; mutace: TP53, jednoduchá, p.Lys132Thr (c.395A>C), heterozygotní: TP53, Simple, p.Arg213Ter (c.637C>T), heterozygotní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte médium, přidejte čerstvý 0,25 % roztok trypsinu a 0,02 % roztok EDTA, nechte kultivační baňku stát 3 až 5 minut při 37''''C, přidejte kultivační médium a odebírejte buňky, přeneste médium do 15ml zkumavky, odstřeďte, odsajte médium, resuspendujte pelety s kultivačním médiem a dávkujte do kultivační baňky
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
53 let
Etnická příslušnost
Korejský