Pāriet uz saturu
SNU-81
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
SNU81, NCI-SNU-81

Dokumenti

SNU-81

Cell line · Preces numurs 305638

The SNU-81 cell line is a human colorectal carcinoma model established from a Korean patient. It is part of a collection of 12 colorectal cancer cell line...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SNU-81 šūnu līnija ir cilvēka kolorektālās karcinomas modelis, kas iegūts no Korejas pacienta. Tā ir daļa no 12 kolorektālā vēža šūnu līnijām, kas iegūtas gan no primārajiem audzējiem, gan metastātiskām vietām, tādējādi nodrošinot daudzveidīgu audzēja bioloģijas atspoguļojumu. SNU-81 tika iegūta no primārās kolorektālās adenokarcinomas, un tai piemīt epitēlija morfoloģija ar adherentu augšanu kultūrā. Šūnu līnija ekspresē karcīnoembrionālo antigēnu (CEA), kas izdalās kultūras supernatantā, atspoguļojot tipiskas kolorektālā audzēja īpašības.

SNU-81 molekulārā līmenī ir veikta plaša ģenētiskā raksturošana. Tajā ir TP53 audzēja supresora gēna mutācija, kas ir izplatīta kolorektālā karcinoģenēzes procesā un parasti saistīta ar vēlākajām audzēja progresēšanas stadijām. Turklāt tika konstatētas APC gēna mutācijas, kas norāda uz Wnt/β-katerīna signalizācijas traucējumiem, kas ir kolorektālā vēža attīstības raksturīga iezīme. Šajā līnijā netika konstatētas K-ras2 gēna aktivizējošas mutācijas. Tika novērotas arī izmaiņas šūnu cikla regulatoros, piemēram, p16 gēna hipermetilācija, kas vēl vairāk apstiprina šūnu līnijas lietderību kolorektālā vēža ģenētisko un epigenētisko mehānismu izpētē. Kopumā SNU-81 kalpo kā labi definēts in vitro modelis audzēja supresoru gēnu funkcijas, onkogēno ceļu regulācijas un reakcijas uz mērķterapiju izpētei kolorektālā vēža pētniecībā.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • SNU81
  • NCI-SNU-81

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
30 stundas

04Identifikatori

Atsauce
SNU-81 (Cytion kataloga numurs 305638)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_5098

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: Ser1392Ter (c.4175C>A), heterozigotiska; mutācija: APC, vienkārša, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), heterozigots; mutācija: APC, vienkāršā, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), heterozigots; mutācija: FBXW7, vienkārša, p.Arg479Gln (c.1436G>A), heterozigota; mutācija: KRAS, vienkārša, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozigota; mutācija: PTEN, vienkārša, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterozigotiska; mutācija: PTEN, vienkārša, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterozigotiska; mutācija: TBX3, vienkārša, p.Glu111Ter (c.331G>T), heterozigota; mutācija: TBX3, vienkārša, c.942-1G>T, heterozigotiska; mutācija: TP53, vienkārša, p.Lys132Thr (c.395A>C), heterozigota; mutācija: TP53, vienkārša, p.Arg213Ter (c.637C>T), heterozigotiska

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņem barotni, pievieno svaigu 0,25 % tripsīna 0,02 % EDTA šķīdumu, 3 līdz 5 minūtes nostādina kolbu 37''''C temperatūrā, pievieno barotni un savāc šūnas, pārnes barotni 15 ml mēģenē, centrifugē, izsūc barotni, atkārtoti suspendē granulas ar barotni un iepilda kolbā ar kultūru
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
53 gadi
Etniskā piederība
Korejas