Siirry sisältöön
SNU-81
Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
SNU81, NCI-SNU-81

Asiakirjat

SNU-81

Cell line · Tuotenumero 305638

The SNU-81 cell line is a human colorectal carcinoma model established from a Korean patient. It is part of a collection of 12 colorectal cancer cell line...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SNU-81-solulinja on korealaisesta potilaasta peräisin oleva ihmisen paksusuolen karsinooman malli. Se on osa 12 paksusuolisyövän solulinjan kokoelmaa, jotka on saatu sekä primaarikasvaimista että etäpesäkkeistä, mikä edustaa monipuolisesti kasvainten biologiaa. SNU-81 on peräisin primaarisesta paksusuolen adenokarsinoomasta, ja sillä on epiteelimorfologia ja se kasvaa tarttuvasti viljelyssä. Solulinja ilmentää karsinoembryonista antigeenia (CEA), jota erittyy viljelynesteeseen, mikä kuvastaa tyypillisiä kolorektaalikasvaimen ominaisuuksia.

Molekyylitasolla SNU-81:lle on tehty laaja geneettinen karakterisointi. Siinä on mutaatio TP53-kasvainsuppressorigeenissä, joka on yleinen tapahtuma paksusuolen karsinogeneesissä ja liittyy tyypillisesti kasvaimen myöhempiin etenemisvaiheisiin. Lisäksi tunnistettiin mutaatioita APC-geenissä, mikä viittaa Wnt/β-kateniinisignaalin häiriintymiseen, joka on kolorektaalisyövän kehittymisen tunnusmerkki. K-ras2-geenissä ei havaittu aktivoivia mutaatioita tässä linjassa. Solusyklin säätelijöissä havaittiin myös muutoksia, kuten p16-geenin hypermetyloitumista, mikä tukee entisestään solulinjan käyttökelpoisuutta kolorektaalisyöpää ohjaavien geneettisten ja epigeneettisten mekanismien tutkimisessa. Kaiken kaikkiaan SNU-81 toimii hyvin määriteltynä in vitro -mallina, jonka avulla voidaan tutkia kasvainsuppressorigeenien toimintaa, onkogeenisten reittien säätelyä ja vastetta kohdennetuille hoidoille paksusuolen syövän tutkimuksessa.

Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • SNU81
  • NCI-SNU-81

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
30 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SNU-81 (Cytionin luettelonumero 305638)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_5098

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: Ser1392Ter (c.4175C>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: APC, yksinkertainen, p.Ser1392Ter (c.4175C>A), heterotsygoottinen: APC, Simple, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), Heterozygous; Mutation: APC, Simple, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), heterotsygoottinen; Mutaatio: APC, Simple, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), heterotsygoottinen; Mutaatio: APC, Simple, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), heterotsygoottinen: FBXW7, Simple, p.Arg479Gln (c.1436G>A), Heterozygous; Mutation: KRAS, yksinkertainen, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: KRAS, yksinkertainen, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: KRAS, yksinkertainen, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterotsygoottinen: PTEN, yksinkertainen, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: PTEN, yksinkertainen, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterotsygoottinen; Mutaatio: PTEN, yksinkertainen, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterotsygoottinen: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterotsygoottinen; Mutaatio: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterotsygoottinen; Mutaatio: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterotsygoottinen: TBX3, Simple, p.Glu111Ter (c.331G>T), Heterozygous; Mutation: TBX3, yksinkertainen, c.942-1G>T, heterotsygoottinen; mutaatio: TBX3, yksinkertainen, c.942-1G>T, heterotsygoottinen; mutaatio: TBX3, yksinkertainen, p.942-1G>T, p.942-1G>T, heterotsygoottinen: TP53, Simple, p.Lys132Thr (c.395A>C), Heterozygous; Mutation: TP53, yksinkertainen, p.Arg213Ter (c.637C>T), heterotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poistetaan elatusaine, lisätään tuoretta 0,25 %:n trypsiiniliuosta, 0,02 %:n EDTA-liuosta, kasvatuspulloa seisotetaan 37''''C:ssa 3-5 minuuttia, lisätään elatusainetta ja kerätään solut, siirretään elatusaine 15 ml:n putkeen, sentrifugoidaan, imetään elatusaine, suspendoidaan pelletit uudelleen elatusaineella ja annostellaan kasvatuspulloon
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
53 vuotta
Etnisyys
Korean