Prejsť na obsah
SNU-81
Tkanivo
Colon
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
SNU81, NCI-SNU-81

Dokumenty

SNU-81

Cell line · Číslo výrobku 305638

The SNU-81 cell line is a human colorectal carcinoma model established from a Korean patient. It is part of a collection of 12 colorectal cancer cell line...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia SNU-81 je model ľudského kolorektálneho karcinómu vytvorený na základe kórejského pacienta. Je súčasťou kolekcie 12 bunkových línií kolorektálneho karcinómu odvodených z primárnych nádorov aj metastáz, ktoré poskytujú rôznorodé zastúpenie nádorovej biológie. SNU-81 bola odvodená z primárneho adenokarcinómu hrubého čreva a vykazuje epitelovú morfológiu s adherentným rastom v kultúre. Bunková línia exprimuje karcinoembryonálny antigén (CEA), ktorý sa vylučuje do kultivačného supernatantu, čo odráža typické vlastnosti kolorektálneho nádoru.

Na molekulárnej úrovni bola SNU-81 podrobená rozsiahlej genetickej charakterizácii. Obsahuje mutáciu v tumor supresorovom géne TP53, čo je bežná udalosť v kolorektálnej karcinogenéze, zvyčajne spojená s neskoršími štádiami progresie nádoru. Okrem toho boli identifikované mutácie v géne APC, ktoré naznačujú narušenie signalizácie Wnt/β-katenínu, ktorá je charakteristickým znakom vývoja kolorektálneho karcinómu. V tejto línii neboli zistené žiadne aktivačné mutácie v géne K-ras2. Pozorovali sa aj zmeny v regulátoroch bunkového cyklu, ako napríklad hypermetylácia génu p16, čo ďalej podporuje užitočnosť bunkovej línie pri štúdiu genetických a epigenetických mechanizmov, ktoré sú príčinou vzniku kolorektálneho karcinómu. Celkovo SNU-81 slúži ako dobre definovaný in vitro model na skúmanie funkcie tumor supresorových génov, regulácie onkogénnych dráh a odpovede na cielené terapie vo výskume kolorektálneho karcinómu.

Tkanivo
Colon
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
  • SNU81
  • NCI-SNU-81

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové
Doba zdvojnásobenia
30 hodín

04Identifikátory

Citácia
SNU-81 (katalógové číslo Cytion 305638)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5098

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: (c.4175C>A), heterozygotná; mutácia: APC, jednoduchá, p.Ser1392Ter (c.4175C>A): Arg1450Ter (c.4348C>T), heterozygotná; mutácia: APC, Simple, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), heterozygotná: Arg2204Ter (c.6610C>T), heterozygotná; mutácia: APC, Simple, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), heterozygotná: FBXW7, jednoduchá, p.Arg479Gln (c.1436G>A), heterozygotná; mutácia: KRAS, jednoduchá, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozygotná; mutácia: PTEN, jednoduchá, p.Arg130Gln (c.389G>A), heterozygotná; mutácia: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterozygotná; mutácia: PTEN, Simple, p.Glu299Ter (c.895G>T), heterozygotná: TBX3, jednoduchá, p.Glu111Ter (c.331G>T), heterozygotná; mutácia: p: TBX3, Simple, c.942-1G>T, Heterozygous; Mutation: TP53, jednoduchá, p.Lys132Thr (c.395A>C), heterozygotná; mutácia: TP53, jednoduchá, p.Arg213Ter (c.637C>T), heterozygotná

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte médium, pridajte čerstvý 0,25 % roztok trypsínu a 0,02 % roztok EDTA, kultivačnú banku nechajte stáť pri 37''''C 3 až 5 minút, pridajte kultivačné médium a odoberte bunky, preneste médium do 15 ml skúmavky, odstreďte, odsajte médium, resuspendujte pelety s kultivačným médiom a dávkujte do kultivačnej banky
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
53 rokov
Etnická príslušnosť
Kórejský