SNU-81

A linhagem celular SNU-81 é um modelo de carcinoma colorretal humano estabelecido a partir de um paciente coreano. Ela faz parte de uma coleção de 12 linhagens celulares de câncer colorretal derivadas tanto de tumores primários quanto de focos metastáticos, proporcionando uma representação diversificada da biologia tumoral. A SNU-81 foi derivada de um adenocarcinoma colorretal primário e apresenta morfologia epitelial com crescimento aderente em cultura. A linha celular expressa o antígeno carcinoembrionário (CEA), que é secretado no sobrenadante da cultura, refletindo características típicas dos tumores colorretais.

No nível molecular, a SNU-81 passou por uma extensa caracterização genética. Ela apresenta uma mutação no gene supressor de tumor TP53, um evento comum na carcinogênese colorretal, tipicamente associado a estágios mais avançados da progressão tumoral. Além disso, foram identificadas mutações no gene APC, o que sugere uma perturbação da via de sinalização Wnt/β-catenina, uma característica marcante do desenvolvimento do câncer colorretal. Não foram detectadas mutações ativadoras no gene K-ras2 nessa linhagem. Também foram observadas alterações nos reguladores do ciclo celular, como a hipermetilação do gene p16, o que reforça ainda mais a utilidade da linhagem celular no estudo dos mecanismos genéticos e epigenéticos que impulsionam o câncer colorretal. De modo geral, a SNU-81 serve como um modelo in vitro bem definido para explorar a função dos genes supressores de tumor, a regulação das vias oncogênicas e a resposta a terapias direcionadas na pesquisa do câncer colorretal.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.