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SNU-81
Tecido
Cólon
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
SNU81, NCI-SNU-81

Documentos

SNU-81

Cell line · Número do produto 305638

The SNU-81 cell line is a human colorectal carcinoma model established from a Korean patient. It is part of a collection of 12 colorectal cancer cell line...

€550.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular SNU-81 é um modelo de carcinoma colorrectal humano estabelecido a partir de um doente coreano. Faz parte de uma coleção de 12 linhas celulares de cancro colorrectal derivadas de tumores primários e de locais metastáticos, proporcionando uma representação diversificada da biologia tumoral. A SNU-81 foi derivada de um adenocarcinoma colorrectal primário e apresenta uma morfologia epitelial com crescimento aderente em cultura. A linha celular expressa o antigénio carcinoembrionário (CEA), que é segregado no sobrenadante da cultura, reflectindo caraterísticas típicas de um tumor colorrectal.

A nível molecular, a SNU-81 foi submetida a uma extensa caraterização genética. Apresenta uma mutação no gene supressor de tumor TP53, um evento comum na carcinogénese colorrectal, tipicamente associado a fases mais avançadas da progressão do tumor. Adicionalmente, foram identificadas mutações no gene APC, implicando a interrupção da sinalização Wnt/β-catenina, uma caraterística do desenvolvimento do cancro colorrectal. Não foram detectadas mutações activadoras no gene K-ras2 para esta linha. Foram também observadas alterações nos reguladores do ciclo celular, como a hipermetilação do gene p16, o que reforça a utilidade desta linha celular no estudo dos mecanismos genéticos e epigenéticos que determinam o cancro colorrectal. Em termos gerais, a SNU-81 serve como um modelo in vitro bem definido para explorar a função do gene supressor de tumores, a regulação da via oncogénica e a resposta a terapias orientadas na investigação do cancro colorrectal.

Tecido
Cólon
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • SNU81
  • NCI-SNU-81

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Epitelial
Tempo de duplicação
30 horas

04Identificadores

Referência
SNU-81 (número de catálogo Cytion 305638)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5098

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: APC, Simples, p.Ser1392Ter (c.4175C>A), Heterozigótica; Mutação: APC, Simples, p.Arg1450Ter (c.4348C>T), Heterozigótica; Mutação: APC, Simples, p.Arg2204Ter (c.6610C>T), Heterozigótica; Mutação: FBXW7, Simples, p.Arg479Gln (c.1436G>A), Heterozigota; Mutação: KRAS, Simples, p.Ala146Thr (c.436G>A), Heterozigota; Mutação: PTEN, Simples, p.Arg130Gln (c.389G>A), Heterozigota; Mutação: PTEN, Simples, p.Glu299Ter (c.895G>T), Heterozigota; Mutação: TBX3, Simples, p.Glu111Ter (c.331G>T), Heterozigota; Mutação: TBX3, Simples, c.942-1G>T, Heterozigota; Mutação: TP53, Simples, p.Lys132Thr (c.395A>C), Heterozigótica; Mutação: TP53, Simples, p.Arg213Ter (c.637C>T), Heterozigótico

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Remover o meio, adicionar uma solução fresca de tripsina a 0,25 % e EDTA a 0,02 %, colocar o frasco de cultura em repouso a 37''''C durante 3 a 5 minutos, adicionar o meio de cultura e recolher as células, transferir o meio para um tubo de 15 ml, centrifugar, aspirar o meio, ressuspender os pellets com o meio de cultura e distribuir no frasco de cultura
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
53 anos
Etnia
Coreano