Μετάβαση στο περιεχόμενο
AT-1
Ιστός
Προστάτης
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Έγγραφα

AT-1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά AT-1 είναι υποκλώνος της γονικής κυτταρικής σειράς αδενοκαρκινώματος αρουραίου R3327. Η συγκεκριμένη κυτταρική σειρά προέρχεται από το μοντέλο Dunning, το οποίο είναι ένα καθιερωμένο μοντέλο που χρησιμοποιείται για τη μελέτη του καρκίνου του προστάτη. Ο υποκλώνος AT-1 χαρακτηρίζεται από σχετικά αργό ρυθμό ανάπτυξης και χαμηλό μεταστατικό δυναμικό σε σύγκριση με άλλους υποκλώνους που προέρχονται από τον ίδιο όγκο, όπως οι κυτταρικές σειρές MatLyLu (υψηλό μεταστατικό δυναμικό) και AT-2 (μέτριο μεταστατικό δυναμικό). Αυτό καθιστά την κυτταρική σειρά AT-1 ιδιαίτερα χρήσιμη για μελέτες που επικεντρώνονται στη βιολογία μη μεταστατικών ή ελάχιστα διηθητικών όγκων.

Σε ερευνητικά πλαίσια, η κυτταρική σειρά AT-1 έχει χρησιμοποιηθεί εκτενώς για τη διερεύνηση των μηχανισμών εξέλιξης του καρκίνου του προστάτη και για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των θεραπευτικών παραγόντων. Τα κύτταρα παρουσιάζουν γενικά κυβοειδή μορφολογία και είναι προσκολλημένα. Έχει αποδειχθεί ότι ανταποκρίνονται σε ορμονικούς χειρισμούς, οι οποίοι μιμούνται τις ορμονικές αποκρίσεις που παρατηρούνται στον κλινικό καρκίνο του προστάτη. Οι μελέτες με τη χρήση της κυτταρικής σειράς ΑΤ-1 έχουν συμβάλει στην καλύτερη κατανόηση των αλληλεπιδράσεων μεταξύ των καρκινικών κυττάρων και του μικροπεριβάλλοντος, της αγγειογένεσης και των μοριακών μονοπατιών που εμπλέκονται στην εξέλιξη του καρκίνου. Είναι σημαντικό ότι η κυτταρική σειρά ΑΤ-1 αποτέλεσε πολύτιμο εργαλείο για την ανάπτυξη θεραπευτικών στρατηγικών που επικεντρώνονται λιγότερο στη μετάσταση και περισσότερο στην ανάπτυξη του πρωτογενούς όγκου και την τοπική διείσδυση.

Ιστός
Προστάτης
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Ιδιότητες ανάπτυξης
Σε επαφή με την επιφάνεια και σε εναιώρημα
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε αρουραίους και γυμνά ποντίκια

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
AT-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 500121)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_3568

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 4 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 48 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.