Ga naar de inhoud
AT-1
Weefsel
Prostaat
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Documenten

AT-1

Cell line · Productnummer 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De AT-1 cellijn is een subkloon van de ouderlijke R3327 prostaatadenocarcinoom cellijn. Deze specifieke cellijn werd afgeleid van het Dunning-model, een beproefd model dat wordt gebruikt om prostaatkanker te bestuderen. De AT-1 subklon wordt gekenmerkt door een relatief langzame groei en een laag metastatisch potentieel in vergelijking met andere subklonen afkomstig van dezelfde tumor, zoals de MatLyLu (hoog metastatisch potentieel) en AT-2 (matig metastatisch potentieel) cellijnen. Dit maakt de AT-1 cellijn bijzonder nuttig voor studies die zich richten op de biologie van niet-metastatische of minimaal invasieve tumoren.

In onderzoekssettings is de AT-1 cellijn uitgebreid gebruikt om de mechanismen van prostaatkankerprogressie te onderzoeken en de werkzaamheid van therapeutische middelen te beoordelen. De cellen vertonen over het algemeen een kubusvormige morfologie en zijn adherent. Er is aangetoond dat ze reageren op hormonale manipulaties, wat de hormonale reacties nabootst die gezien worden in klinische prostaatkanker. Studies met de AT-1 cellijn hebben bijgedragen aan een beter begrip van de interacties tussen tumorcellen en de micro-omgeving, angiogenese en de moleculaire routes die betrokken zijn bij kankerprogressie. Belangrijk is dat de AT-1 cellijn een waardevol hulpmiddel is geweest bij de ontwikkeling van therapeutische strategieën die minder gericht zijn op metastase en meer op primaire tumorgroei en lokale invasie.

Weefsel
Prostaat
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Classificatie

Organisme
Rat
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in ratten en naaktmuizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
AT-1 (Cytion catalogusnummer 500121)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_3568

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 4 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 48 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.