Tartalomra ugrás
AT-1
Szövet
Prosztata
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Dokumentumok

AT-1

Cell line · Termékszám 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az AT-1 sejtvonal a szülői R3327 patkány prosztata adenokarcinóma sejtvonal szubklónja. Ez a sejtvonal a Dunning modellből származik, amely a prosztatarák tanulmányozására használt, jól bevált modell. Az AT-1 szubklónt viszonylag lassú növekedési sebesség és alacsony metasztatikus potenciál jellemzi az ugyanabból a tumorból származó más szubklónokhoz képest, mint például a MatLyLu (magas metasztatikus potenciál) és AT-2 (mérsékelt metasztatikus potenciál) sejtvonalak. Ez teszi az AT-1 sejtvonalat különösen hasznossá a nem metasztatikus vagy minimálisan invazív tumorok biológiájára összpontosító vizsgálatokhoz.

A kutatásban az AT-1 sejtvonalat széles körben használták a prosztatarák progressziójának mechanizmusainak vizsgálatára és a terápiás szerek hatékonyságának értékelésére. A sejtek általában kuboidális morfológiát mutatnak és tapadnak. Kimutatták, hogy hormonális manipulációkra reagálnak, ami utánozza a klinikai prosztatarákban megfigyelhető hormonális válaszokat. Az AT-1 sejtvonalon végzett vizsgálatok hozzájárultak a tumorsejtek és a mikrokörnyezet közötti kölcsönhatások, az angiogenezis és a rák progressziójában szerepet játszó molekuláris útvonalak jobb megértéséhez. Fontos, hogy az AT-1 sejtvonal értékes eszköznek bizonyult az olyan terápiás stratégiák kifejlesztésében, amelyek kevésbé az áttétképzésre, hanem inkább az elsődleges tumor növekedésére és a helyi invázióra összpontosítanak.

Szövet
Prosztata
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Növekedési tulajdonságok
Adherens és szuszpenziós
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, patkányokon és meztelen egereken

04Azonosítók

Hivatkozás
AT-1 (Cytion katalógusszám: 500121)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_3568

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 4 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felépüljenek a fagyasztási folyamatból, és legalább 48 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.