Preskoči na vsebino
AT-1
Tkivo
Prostata
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Dokumenti

AT-1

Cell line · Številka izdelka 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija AT-1 je podklon starševske celične linije R3327 adenokarcinoma prostate podgan. Ta posebna celična linija je bila pridobljena iz modela Dunning, ki je uveljavljen model za preučevanje raka prostate. Za podklon AT-1 je značilna razmeroma počasna rast in majhen metastatski potencial v primerjavi z drugimi podkloni, pridobljenimi iz istega tumorja, kot sta celični liniji MatLyLu (velik metastatski potencial) in AT-2 (zmeren metastatski potencial). Zaradi tega je celična linija AT-1 še posebej uporabna za študije, ki se osredotočajo na biologijo nemetastatskih ali minimalno invazivnih tumorjev.

V raziskovalnih okoljih se celična linija AT-1 pogosto uporablja za raziskovanje mehanizmov napredovanja raka prostate in ocenjevanje učinkovitosti terapevtskih sredstev. Celice imajo na splošno kubično morfologijo in so adherentne. Pokazalo se je, da se odzivajo na hormonske manipulacije, kar posnema hormonske odzive, ki jih opažamo pri kliničnem raku prostate. Študije z uporabo celične linije AT-1 so prispevale k boljšemu razumevanju interakcij med tumorskimi celicami in mikrookoljem, angiogeneze in molekularnih poti, ki sodelujejo pri napredovanju raka. Pomembno je, da je bila celična linija AT-1 dragoceno orodje pri razvoju terapevtskih strategij, ki so manj osredotočene na metastaze in bolj na primarno rast tumorja in lokalno invazijo.

Tkivo
Prostata
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, pri podganah in golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
AT-1 (kataloška številka Cytion 500121)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3568

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju nanesite celice v koncentraciji 4 x 104 celic/cm2 in pustite, da se celice opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.