Pāriet uz saturu
AT-1
Audums
Prostatas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Dokumenti

AT-1

Cell line · Preces numurs 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

AT-1 šūnu līnija ir vecākās R3327 žurku prostatas adenokarcinomas šūnu līnijas subklons. Šī konkrētā šūnu līnija tika iegūta no Dunninga modeļa, kas ir plaši izmantots modelis prostatas vēža izpētei. AT-1 subklonam ir raksturīgs relatīvi lēns augšanas ātrums un zems metastatiskais potenciāls salīdzinājumā ar citiem subkloniem, kas iegūti no tā paša audzēja, piemēram, MatLyLu (augsts metastatiskais potenciāls) un AT-2 (mērens metastatiskais potenciāls) šūnu līnijām. Tāpēc AT-1 šūnu līnija ir īpaši noderīga pētījumiem, kas vērsti uz nemetastātisku vai minimāli invazīvu audzēju bioloģiju.

Pētījumos AT-1 šūnu līnija ir plaši izmantota, lai pētītu prostatas vēža progresēšanas mehānismus un novērtētu terapeitisko līdzekļu efektivitāti. Šīm šūnām parasti ir kubveida morfoloģija un tās ir adherētas. Ir pierādīts, ka tās reaģē uz hormonālām manipulācijām, kas imitē klīniskajā prostatas vēža gadījumā novēroto hormonālo reakciju. Pētījumi, kuros izmantota AT-1 šūnu līnija, ir veicinājuši labāku izpratni par audzēja šūnu mijiedarbību ar mikrovidi, angiogēzi un vēža progresēšanā iesaistītajiem molekulārajiem ceļiem. Svarīgi, ka AT-1 šūnu līnija ir bijusi vērtīgs instruments, izstrādājot terapeitiskās stratēģijas, kas mazāk vērstas uz metastāzēm, bet vairāk uz primāro audzēja augšanu un vietējo invaziju.

Audums
Prostatas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, žurkām un kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
AT-1 (Cytion kataloga numurs 500121)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_3568

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 4 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.