Gå direkte til indholdet
AT-1
Væv
Prostata
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
R-3327-AT-1, AT1, AT-1-TC, Dunning R-3327 AT-1, R3327-AT1

Dokumenter

AT-1

Cell line · Varenummer 500121

The AT-1 cell line is a subclone of the parental R3327 rat prostate adenocarcinoma cell line. This particular cell line was derived from the Dunning model...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

AT-1-cellelinjen er en subklon af den parentale R3327-rotteprostata-adenokarcinomcellelinje. Denne særlige cellelinje stammer fra Dunning-modellen, som er en veletableret model, der bruges til at studere prostatakræft. AT-1-subklonen er kendetegnet ved sin relativt langsomme vækst og lave metastatiske potentiale sammenlignet med andre subkloner, der stammer fra samme tumor, såsom MatLyLu- (højt metastatisk potentiale) og AT-2-cellelinjerne (moderat metastatisk potentiale). Det gør AT-1-cellelinjen særlig nyttig til undersøgelser, der fokuserer på biologien i ikke-metastatiske eller minimalt invasive tumorer.

I forskningssammenhæng er AT-1-cellelinjen blevet brugt flittigt til at undersøge mekanismerne bag udviklingen af prostatacancer og til at vurdere effekten af terapeutiske midler. Cellerne udviser generelt en kuboidal morfologi og er klæbende. De har vist sig at reagere på hormonelle manipulationer, som efterligner de hormonelle reaktioner, der ses i klinisk prostatakræft. Undersøgelser med AT-1-cellelinjen har bidraget til en bedre forståelse af samspillet mellem tumorceller og mikromiljøet, angiogenese og de molekylære veje, der er involveret i kræftprogression. Det er vigtigt, at AT-1-cellelinjen har været et værdifuldt værktøj i udviklingen af terapeutiske strategier, der er mindre fokuseret på metastaser og mere på primær tumorvækst og lokal invasion.

Væv
Prostata
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • R-3327-AT-1
  • AT1
  • AT-1-TC
  • Dunning R-3327 AT-1
  • R3327-AT1

02Klassificering

Organisme
Rotte
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i rotter og nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
AT-1 (Cytion katalognummer 500121)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_3568

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 4 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.