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SK-MEL-29.1
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SK-MEL-29.1

Cell line · Número de producto 300429

SK-MEL-29.1 es una línea celular de melanoma que ha sido objeto de numerosos estudios por sus interacciones con el sistema inmunitario, especialmente en el contexto de la citotoxicidad...

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01Información general

Descripción

SK-MEL-29.1 es una línea celular de melanoma que ha sido ampliamente estudiada por sus interacciones con el sistema inmune, particularmente en el contexto del reconocimiento de linfocitos T citotóxicos (CTL). Este subclon de la línea de melanoma SK-MEL-29 se ha utilizado en investigación inmunológica para definir antígenos específicos reconocidos por CTL autólogos. Estos CTL se dirigen selectivamente a las células de melanoma que expresan determinados antígenos, al tiempo que evitan las células no cancerosas. En experimentos de inmunoselección, se descubrió que SK-MEL-29.1 expresa antígenos estables que son importantes para la lisis específica de células de melanoma por parte de los CTL, lo que permite comprender mejor la inmunogenicidad tumoral y la evasión inmunitaria.

Uno de los estudios clave con SK-MEL-29.1 demostró su utilidad en la investigación de la inmunoterapia del cáncer. Se demostró que los clones de CTL derivados de AV de pacientes se dirigen eficazmente a las células SK-MEL-29.1, que expresan múltiples antígenos simultáneamente. Esto convierte a SK-MEL-29.1 en un modelo importante para comprender cómo se pueden adaptar las respuestas inmunitarias para atacar antígenos específicos en el melanoma. La capacidad de estos clones CTL para identificar y lisar células de melanoma proporciona información valiosa para el desarrollo de estrategias inmunoterapéuticas, incluida la posibilidad de generar vacunas personalizadas contra el cáncer.

Además, las células SK-MEL-29.1 también se han probado en el desarrollo de vacunas contra el cáncer basadas en virus. La infección con el virus de la enfermedad de Newcastle (VEN), un virus con propiedades oncolíticas e inmunoestimuladoras, demostró que SK-MEL-29.1 puede ser infectada eficientemente por el VEN incluso después de la irradiación gamma, lo que la convierte en una candidata adecuada para el desarrollo de vacunas vivas contra el cáncer. Esta infección aumenta la inmunogenicidad de las células tumorales, lo que conduce a una respuesta inmunitaria antitumoral más robusta, apoyando aún más el uso de SK-MEL-29.1 en la investigación de vacunas.

Pañuelo de papel
Piel
Enfermedad
Melanoma

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
SK-MEL-29.1 (número de catálogo 300429 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
19 años