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SK-MEL-29.1
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Melanom

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SK-MEL-29.1

Cell line · Artikelnummer 300429

SK-MEL-29.1 ist eine Melanom-Zelllinie, die hinsichtlich ihrer Wechselwirkungen mit dem Immunsystem, insbesondere im Zusammenhang mit zytotoxischen ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

SK-MEL-29.1 ist eine Melanomzelllinie, deren Interaktionen mit dem Immunsystem, insbesondere im Zusammenhang mit der Erkennung durch zytotoxische T-Lymphozyten (CTL), eingehend untersucht wurden. Dieser Subklon der SK-MEL-29-Melanomlinie wurde in der immunologischen Forschung verwendet, um spezifische Antigene zu definieren, die von autologen CTLs erkannt werden. Diese CTLs richten sich selektiv gegen Melanomzellen, die bestimmte Antigene exprimieren, und verschonen dabei nicht krebsartige Zellen. In Experimenten zur Immunselektion wurde festgestellt, dass SK-MEL-29.1 stabile Antigene exprimiert, die für die spezifische Lyse von Melanomzellen durch CTLs wichtig sind, was Einblicke in die Immunogenität von Tumoren und die Umgehung des Immunsystems ermöglicht.

In einer der wichtigsten Studien mit SK-MEL-29.1 wurde sein Nutzen für die Krebsimmuntherapieforschung nachgewiesen. Es wurde gezeigt, dass CTL-Klone, die von AV-Patienten stammen, wirksam gegen SK-MEL-29.1-Zellen vorgehen, die mehrere Antigene gleichzeitig exprimieren. Dies macht SK-MEL-29.1 zu einem wichtigen Modell, um zu verstehen, wie Immunantworten auf spezifische Antigene in Melanomen zugeschnitten werden können. Die Fähigkeit dieser CTL-Klone, Melanomzellen zu identifizieren und zu lysieren, liefert wertvolle Informationen für die Entwicklung immuntherapeutischer Strategien, einschließlich der Möglichkeit, personalisierte Krebsimpfstoffe herzustellen.

Darüber hinaus wurden SK-MEL-29.1-Zellen auch bei der Entwicklung von virusbasierten Krebsimpfstoffen getestet. Die Infektion mit dem Newcastle-Disease-Virus (NDV), einem Virus mit onkolytischen und immunstimulierenden Eigenschaften, hat gezeigt, dass SK-MEL-29.1 auch nach einer Gammabestrahlung effizient mit NDV infiziert werden kann, was sie zu einem geeigneten Kandidaten für die Entwicklung von Lebendimpfstoffen gegen Krebs macht. Diese Infektion erhöht die Immunogenität der Tumorzellen und führt zu einer robusteren Anti-Tumor-Immunantwort, was die Verwendung von SK-MEL-29.1 in der Impfstoffforschung weiter unterstützt.

Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
SK-MEL-29.1 (Cytion-Katalognummer 300429)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
19 Jahre