Mine otse sisu juurde
SK-MEL-29.1
Kude
Nahk
Haigus
Melanoom

Dokumendid

SK-MEL-29.1

Cell line · Toote number 300429

SK-MEL-29.1 on melanoomi rakuliin, mida on põhjalikult uuritud seoses selle vastastikmõjudega immuunsüsteemiga, eelkõige tsütotoksilise...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-MEL-29.1 on melanoomi rakuliin, mille koostoimet immuunsüsteemiga, eelkõige tsütotoksiliste T-lümfotsüütide (CTL) äratundmise kontekstis, on põhjalikult uuritud. Seda SK-MEL-29 melanoomiliini alamklooni on kasutatud immunoloogilistes uuringutes, et määratleda spetsiifilisi antigeene, mida autoloogsed CTLid tunnevad. Need CTLid on selektiivselt suunatud teatavaid antigeene ekspresseerivate melanoomirakkude vastu, säästes samal ajal mittekantseroosseid rakke. Immunoselektsioonikatsetes leiti, et SK-MEL-29.1 ekspresseerib stabiilseid antigeene, mis on olulised melanoomirakkude spetsiifilise lüüsi jaoks CTLide poolt, andes ülevaate kasvaja immunogeensusest ja immuunsüsteemi vältimisest.

Üks peamisi uuringuid, milles kasutati SK-MEL-29.1, näitas selle kasulikkust vähi immunoteraapia uuringutes. Patsientide AV-st saadud CTL-kloonide puhul näidati, et need on tõhusalt suunatud SK-MEL-29.1 rakkude vastu, mis ekspresseerivad samaaegselt mitmeid antigeene. See muudab SK-MEL-29.1 oluliseks mudeliks, et mõista, kuidas immuunvastuseid saab kohandada nii, et need oleksid suunatud konkreetsetele antigeenidele melanoomi puhul. Nende CTL-kloonide võime melanoomirakke tuvastada ja lüüsida annab väärtuslikku teavet immuunterapeutiliste strateegiate väljatöötamiseks, sealhulgas võimaluse luua personaliseeritud vähivaktsiine.

Lisaks on SK-MEL-29.1 rakke katsetatud ka viiruspõhise vähivaktsiini väljatöötamisel. Nakatamine Newcastle'i haiguse viirusega (NDV), millel on onkolüütilised ja immuunsust stimuleerivad omadused, näitas, et SK-MEL-29.1 võib tõhusalt nakatada NDV-ga isegi pärast gammakiirgust, mis muudab selle sobivaks kandidaadiks vähivaktsiinide arendamiseks. Selline infektsioon suurendab kasvajarakkude immunogeensust, mis viib tugevama kasvajavastase immuunvastuse tekkimiseni, mis toetab veelgi SK-MEL-29.1 kasutamist vaktsiiniuuringutes.

Kude
Nahk
Haigus
Melanoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
SK-MEL-29.1 (Cytioni katalooginumber 300429)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
19 aastat