Skip to content
SK-MEL-29.1
Tissue
עור
Disease
מלנומה

Documents

SK-MEL-29.1

Cell line · Product number 300429

SK-MEL-29.1 is a melanoma cell line that has been extensively studied for its interactions with the immune system, particularly in the context of cytotoxi...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

SK-MEL-29.1 הוא קו תאים של מלנומה שנחקר בהרחבה בשל האינטראקציות שלו עם מערכת החיסון, במיוחד בהקשר של זיהוי תאי T ציטוטוקסיים (CTL). תת-שיבוט זה של קו המלנומה SK-MEL-29 שימש במחקר אימונולוגי כדי להגדיר אנטיגנים ספציפיים המזוהים על ידי CTL אוטולוגיים. תאי CTL אלה פועלים באופן סלקטיבי נגד תאי מלנומה המבטאים אנטיגנים מסוימים, תוך שהם חוסכים בתאים שאינם סרטניים. בניסויי אימונו-סלקציה, נמצא כי SK-MEL-29.1 מבטא אנטיגנים יציבים החשובים לליזיס ספציפי של תאי מלנומה על ידי תאי CTL, ומספק תובנות לגבי אימונוגניות הגידול והימנעות ממערכת החיסון.

אחד המחקרים המרכזיים שבוצעו עם SK-MEL-29.1 הדגים את יעילותו במחקר האימונותרפיה לסרטן. שיבוטים של תאי CTL שמקורם בחולה AV הוכחו כיעילים בהתמקדות בתאי SK-MEL-29.1, המבטאים מספר אנטיגנים בו-זמנית. עובדה זו הופכת את SK-MEL-29.1 למודל חשוב להבנת האופן שבו ניתן להתאים את התגובה החיסונית למטרה של אנטיגנים ספציפיים במלנומה. היכולת של שיבוטים אלה של תאי CTL לזהות ולפרק תאי מלנומה מספקת מידע חשוב לפיתוח אסטרטגיות אימונותרפיות, כולל האפשרות לייצר חיסונים מותאמים אישית לסרטן.

יתר על כן, תאי SK-MEL-29.1 נבדקו גם בפיתוח חיסונים נגד סרטן מבוססי נגיפים. זיהום בנגיף מחלת ניוקאסל (NDV), נגיף בעל תכונות אונקוליטיות ומעוררות חיסון, הוכיח כי SK-MEL-29.1 יכול להידבק ביעילות ב-NDV גם לאחר הקרנת גמא, מה שהופך אותו למועמד מתאים לפיתוח חיסונים חיים נגד סרטן. זיהום זה משפר את החיסוניות של תאי הגידול, מה שמוביל לתגובה חיסונית חזקה יותר נגד הגידול, מה שתומך עוד יותר בשימוש ב-SK-MEL-29.1 במחקר חיסונים.

Tissue
עור
Disease
מלנומה

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
SK-MEL-29.1 (מספר קטלוגי Cytion 300429)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
19 שנים