Skip to content
SK-MEL-29.1
Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมา

Documents

SK-MEL-29.1

Cell line · Product number 300429

SK-MEL-29.1 is a melanoma cell line that has been extensively studied for its interactions with the immune system, particularly in the context of cytotoxi...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

SK-MEL-29.1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาที่ได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวางเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์กับระบบภูมิคุ้มกัน โดยเฉพาะในบริบทของการรับรู้โดยเซลล์ลิมโฟไซต์ที (CTL) ที่เป็นพิษต่อเซลล์เป้าหมาย สายพันธุ์ย่อยนี้ของสายพันธุ์มะเร็งเมลาโนมา SK-MEL-29 ถูกนำมาใช้ในการวิจัยทางภูมิคุ้มกันเพื่อกำหนดแอนติเจนเฉพาะที่เซลล์ CTL ของผู้ป่วยเองสามารถจดจำได้เซลล์ CTL เหล่านี้เลือกโจมตีเฉพาะเซลล์มะเร็งผิวหนังที่แสดงแอนติเจนบางชนิด ในขณะที่ไม่ทำลายเซลล์ที่ไม่เป็นมะเร็ง ในการทดลองคัดเลือกทางภูมิคุ้มกัน พบว่า SK-MEL-29.1 แสดงแอนติเจนที่คงที่ซึ่งมีความสำคัญต่อการทำลายเซลล์มะเร็งผิวหนังโดยเซลล์ CTL โดยเฉพาะ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับภูมิคุ้มกันของเนื้องอกและการหลบเลี่ยงภูมิคุ้มกัน

หนึ่งในงานวิจัยสำคัญที่เกี่ยวข้องกับ SK-MEL-29.1 แสดงให้เห็นถึงประโยชน์ของมันในการวิจัยภูมิคุ้มกันบำบัดมะเร็ง พบว่าโคลน CTL ที่สกัดจาก AV ของผู้ป่วยสามารถมุ่งเป้าไปที่เซลล์ SK-MEL-29.1 ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งเซลล์เหล่านี้แสดงแอนติเจนหลายชนิดพร้อมกัน สิ่งนี้ทำให้ SK-MEL-29.1 เป็นแบบจำลองที่สำคัญในการทำความเข้าใจว่าภูมิคุ้มกันสามารถปรับให้มุ่งเป้าไปที่แอนติเจนเฉพาะในมะเร็งผิวหนังได้อย่างไรความสามารถของโคลน CTL เหล่านี้ในการระบุและทำลายเซลล์เมลาโนมาให้ข้อมูลที่มีค่าสำหรับการพัฒนาวิธีการรักษาด้วยภูมิคุ้มกัน รวมถึงความเป็นไปได้ในการสร้างวัคซีนมะเร็งที่ปรับให้เหมาะกับบุคคล

นอกจากนี้ เซลล์ SK-MEL-29.1 ยังได้รับการทดสอบในการพัฒนาวัคซีนมะเร็งที่ใช้ไวรัสเป็นฐานอีกด้วย การติดเชื้อไวรัส Newcastle disease (NDV) ซึ่งเป็นไวรัสที่มีคุณสมบัติในการทำลายเซลล์มะเร็งและกระตุ้นภูมิคุ้มกัน แสดงให้เห็นว่า SK-MEL-29.1 สามารถติดเชื้อ NDV ได้อย่างมีประสิทธิภาพแม้หลังจากการฉายรังสีแกมมา ทำให้เป็นเซลล์ที่เหมาะสมสำหรับการพัฒนาวัคซีนมะเร็งชนิดมีชีวิตการติดเชื้อนี้ช่วยเพิ่มความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันของเซลล์เนื้องอก ส่งผลให้เกิดการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อเนื้องอกที่แข็งแกร่งยิ่งขึ้น ซึ่งเป็นการสนับสนุนเพิ่มเติมในการใช้ SK-MEL-29.1 ในการวิจัยวัคซีน

Tissue
ผิวหนัง
Disease
เมลาโนมา

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
SK-MEL-29.1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300429)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
19 ปี