SK-MEL-29.1
Cell line · Product number 300429
SK-MEL-29.1 is a melanoma cell line that has been extensively studied for its interactions with the immune system, particularly in the context of cytotoxi...
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01General information
- Description
SK-MEL-29.1 是一種黑色素瘤細胞系，其與免疫系統的相互作用已受到廣泛研究，特別是在細胞毒性 T 淋巴細胞（CTL）識別的背景下。 作為 SK-MEL-29 黑色素瘤細胞系的亞克隆，該細胞系已被用於免疫學研究，以釐清自體 CTL 所識別的特定抗原。這些 CTL 會選擇性地攻擊表達特定抗原的黑色素瘤細胞，同時不傷害非癌細胞。 在免疫篩選實驗中，發現 SK-MEL-29.1 會表達穩定抗原，這些抗原對於 CTL 特異性裂解黑色素瘤細胞至關重要，從而為腫瘤免疫原性及免疫逃逸機制提供了重要見解。
一項涉及 SK-MEL-29.1 的關鍵研究，證實了其在癌症免疫療法研究中的實用價值。研究顯示，源自患者 AV 的 CTL 克隆能有效靶向同時表達多種抗原的 SK-MEL-29.1 細胞。 這使得 SK-MEL-29.1 成為理解如何針對黑色素瘤中的特定抗原量身定制免疫反應的重要模型。這些 CTL 克隆識別並裂解黑色素瘤細胞的能力，為免疫治療策略的開發提供了寶貴資訊，包括開發個人化癌症疫苗的可能性。
此外，SK-MEL-29.1 細胞亦已被用於基於病毒的癌症疫苗開發測試。 經由具有溶瘤及免疫刺激特性的紐卡素病病毒（NDV）感染實驗顯示，即使經過伽馬輻射照射後，SK-MEL-29.1 仍能被 NDV 有效感染，使其成為開發活體癌症疫苗的合適候選細胞。 這種感染可增強腫瘤細胞的免疫原性，從而引發更強勁的抗腫瘤免疫反應，進一步支持將 SK-MEL-29.1 應用於疫苗研究。
- Tissue
- 皮膚
- Disease
- 黑色素瘤
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮性
04Identifiers
- Citation
- SK-MEL-29.1（Cytion 型號 300429）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_IY54
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 19年
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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