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SK-MEL-29.1
Tissue
Piel
Disease
Melanoma

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SK-MEL-29.1

Cell line · Product number 300429

SK-MEL-29.1 is a melanoma cell line that has been extensively studied for its interactions with the immune system, particularly in the context of cytotoxi...

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1

01General information

Description

SK-MEL-29.1 es una línea celular de melanoma que ha sido ampliamente estudiada por sus interacciones con el sistema inmunológico, particularmente en el contexto del reconocimiento por parte de los linfocitos T citotóxicos (CTL). Este subclon de la línea de melanoma SK-MEL-29 se ha utilizado en investigaciones inmunológicas para identificar antígenos específicos reconocidos por los linfocitos T citotóxicos autólogos. Estos linfocitos T citotóxicos atacan selectivamente a las células de melanoma que expresan ciertos antígenos, sin afectar a las células no cancerosas. En experimentos de inmunoselección, se descubrió que SK-MEL-29.1 expresa antígenos estables que son importantes para la lisis específica de las células de melanoma por parte de los CTL, lo que brinda información sobre la inmunogenicidad tumoral y la evasión inmunológica.

Uno de los estudios clave en los que se utilizó la línea SK-MEL-29.1 demostró su utilidad en la investigación sobre la inmunoterapia contra el cáncer. Se demostró que los clones de CTL derivados del paciente AV atacaban eficazmente a las células SK-MEL-29.1, las cuales expresan múltiples antígenos simultáneamente. Esto convierte a SK-MEL-29.1 en un modelo importante para comprender cómo se pueden adaptar las respuestas inmunitarias para atacar antígenos específicos en el melanoma. La capacidad de estos clones de CTL para identificar y lisar células de melanoma brinda información valiosa para el desarrollo de estrategias inmunoterapéuticas, incluida la posibilidad de generar vacunas personalizadas contra el cáncer.

Además, las células SK-MEL-29.1 también se han evaluado en el desarrollo de vacunas contra el cáncer basadas en virus. La infección con el virus de la enfermedad de Newcastle (NDV), un virus con propiedades oncolíticas e inmunoestimulantes, demostró que las células SK-MEL-29.1 pueden infectarse eficazmente con el NDV incluso después de la irradiación con rayos gamma, lo que las convierte en candidatas adecuadas para el desarrollo de vacunas vivas contra el cáncer. Esta infección potencia la inmunogenicidad de las células tumorales, lo que conduce a una respuesta inmunitaria antitumoral más sólida, lo que respalda aún más el uso de SK-MEL-29.1 en la investigación de vacunas.

Tissue
Piel
Disease
Melanoma

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Epithelial

04Identifiers

Citation
SK-MEL-29.1 (número de catálogo de Cytion 300429)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

07Donor

Donor age
19 años