Přejít na obsah
SK-MEL-29.1
Tkáň
Kůže
Nemoc
Melanom

Dokumenty

SK-MEL-29.1

Cell line · Číslo výrobku 300429

SK-MEL-29.1 je buněčná linie melanomu, která byla důkladně zkoumána z hlediska jejích interakcí s imunitním systémem, zejména v souvislosti s cytotoxickou...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

SK-MEL-29.1 je melanomová buněčná linie, která byla podrobně studována z hlediska interakcí s imunitním systémem, zejména v souvislosti s rozpoznáváním cytotoxických T-lymfocytů (CTL). Tento subklon melanomové linie SK-MEL-29 byl použit v imunologickém výzkumu k definování specifických antigenů rozpoznávaných autologními CTL. Tyto CTL se selektivně zaměřují na melanomové buňky exprimující určité antigeny, přičemž šetří nenádorové buňky. V imunoselekčních pokusech bylo zjištěno, že SK-MEL-29.1 exprimuje stabilní antigeny, které jsou důležité pro specifickou lýzu melanomových buněk CTL, což poskytuje poznatky o nádorové imunogenicitě a imunitním úniku.

Jedna z klíčových studií zahrnujících SK-MEL-29.1 prokázala jeho užitečnost ve výzkumu imunoterapie rakoviny. Bylo prokázáno, že klony CTL odvozené z AV pacientů účinně cílí na buňky SK-MEL-29.1, které exprimují více antigenů současně. Díky tomu je SK-MEL-29.1 důležitým modelem pro pochopení toho, jak lze imunitní odpovědi přizpůsobit cílení na specifické antigeny u melanomu. Schopnost těchto klonů CTL identifikovat a lyzovat buňky melanomu poskytuje cenné informace pro vývoj imunoterapeutických strategií, včetně možnosti generování personalizovaných protinádorových vakcín.

Kromě toho byly buňky SK-MEL-29.1 testovány také při vývoji protinádorových vakcín na bázi virů. Infekce virem Newcastleské choroby (NDV), virem s onkolytickými a imunostimulačními vlastnostmi, prokázala, že buňky SK-MEL-29.1 mohou být účinně infikovány virem NDV i po ozáření gama zářením, což z nich činí vhodného kandidáta pro vývoj živých vakcín proti rakovině. Tato infekce zvyšuje imunogenicitu nádorových buněk, což vede k silnější protinádorové imunitní odpovědi a dále podporuje použití SK-MEL-29.1 ve výzkumu vakcín.

Tkáň
Kůže
Nemoc
Melanom

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
SK-MEL-29.1 (katalogové číslo Cytion 300429)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
19 let