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SK-MEL-29.1
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Maladie
Mélanome

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SK-MEL-29.1

Cell line · Référence du produit 300429

SK-MEL-29.1 est une lignée cellulaire de mélanome qui a fait l'objet de nombreuses études portant sur ses interactions avec le système immunitaire, notamment dans le cadre de la cytotoxicité...

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1

01Informations générales

Description

SK-MEL-29.1 est une lignée cellulaire de mélanome qui a été largement étudiée pour ses interactions avec le système immunitaire, en particulier dans le contexte de la reconnaissance des lymphocytes T cytotoxiques (CTL). Ce sous-clone de la lignée de mélanome SK-MEL-29 a été utilisé dans la recherche immunologique pour définir les antigènes spécifiques reconnus par les CTL autologues. Ces CTL ciblent sélectivement les cellules de mélanome exprimant certains antigènes, tout en épargnant les cellules non cancéreuses. Des expériences d'immunosélection ont montré que SK-MEL-29.1 exprimait des antigènes stables importants pour la lyse spécifique des cellules de mélanome par les CTL, ce qui permet de mieux comprendre l'immunogénicité des tumeurs et l'évasion immunitaire.

L'une des principales études portant sur SK-MEL-29.1 a démontré son utilité dans la recherche sur l'immunothérapie du cancer. Il a été démontré que les clones CTL dérivés de patients AV ciblent efficacement les cellules SK-MEL-29.1, qui expriment simultanément plusieurs antigènes. Cela fait de SK-MEL-29.1 un modèle important pour comprendre comment les réponses immunitaires peuvent être adaptées pour cibler des antigènes spécifiques dans le mélanome. La capacité de ces clones CTL à identifier et à lyser les cellules de mélanome fournit des informations précieuses pour le développement de stratégies immunothérapeutiques, y compris la possibilité de générer des vaccins anticancéreux personnalisés.

Par ailleurs, les cellules SK-MEL-29.1 ont également été testées dans le cadre du développement de vaccins anticancéreux à base de virus. L'infection par le virus de la maladie de Newcastle (NDV), un virus aux propriétés oncolytiques et immunostimulantes, a démontré que les cellules SK-MEL-29.1 peuvent être efficacement infectées par le NDV même après une irradiation aux rayons gamma, ce qui en fait un candidat approprié pour le développement de vaccins vivants contre le cancer. Cette infection renforce l'immunogénicité des cellules tumorales, entraînant une réponse immunitaire anti-tumorale plus robuste, ce qui renforce l'utilisation de SK-MEL-29.1 dans la recherche sur les vaccins.

Tissu
Peau
Maladie
Mélanome

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
SK-MEL-29.1 (numéro de catalogue Cytion 300429)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
19 ans