Ga naar de inhoud
SK-MEL-29.1
Weefsel
Huid
Ziekte
Melanoom

Documenten

SK-MEL-29.1

Cell line · Productnummer 300429

SK-MEL-29.1 is een melanoomcellijn die uitgebreid is onderzocht op zijn interacties met het immuunsysteem, met name in de context van cytotoxische...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

SK-MEL-29.1 is een melanoomcellijn die uitgebreid is bestudeerd op zijn interacties met het immuunsysteem, met name in de context van de herkenning door cytotoxische T-lymfocyten (CTL). Deze subkloon van de SK-MEL-29 melanoomlijn is gebruikt in immunologisch onderzoek om specifieke antigenen te definiëren die herkend worden door autologe CTL's. Deze CTL's richten zich selectief tegen melanoom. Deze CTL's richten zich selectief op melanoomcellen die bepaalde antigenen tot expressie brengen, terwijl niet-kankercellen gespaard blijven. In immunoselectie-experimenten bleek dat SK-MEL-29.1 stabiele antigenen tot expressie brengt die belangrijk zijn voor de specifieke lysis van melanoomcellen door CTL's, wat inzicht geeft in de immunogeniciteit en immuunontwijking van tumoren.

Een van de belangrijkste onderzoeken met SK-MEL-29.1 toonde het nut ervan aan voor onderzoek naar kankerimmunotherapie. CTL-klonen afkomstig van AV van patiënten bleken zich effectief te richten tegen SK-MEL-29.1 cellen, die meerdere antigenen tegelijk tot expressie brengen. Dit maakt SK-MEL-29.1 tot een belangrijk model om te begrijpen hoe immuunreacties kunnen worden afgestemd op specifieke antigenen in melanoom. Het vermogen van deze CTL-klonen om melanoomcellen te identificeren en te lyseren levert waardevolle informatie op voor de ontwikkeling van immunotherapeutische strategieën, waaronder de mogelijkheid om gepersonaliseerde kankervaccins te maken.

Verder zijn SK-MEL-29.1 cellen ook getest in de ontwikkeling van virusgebaseerde kankervaccins. Infectie met het Newcastle disease-virus (NDV), een virus met oncolytische en immuunstimulerende eigenschappen, toonde aan dat SK-MEL-29.1 efficiënt kan worden geïnfecteerd door NDV, zelfs na gammabestraling, waardoor het een geschikte kandidaat is voor de ontwikkeling van levende kankervaccins. Deze infectie verhoogt de immunogeniciteit van de tumorcellen, wat leidt tot een robuustere anti-tumor immuunrespons, wat het gebruik van SK-MEL-29.1 in vaccinonderzoek verder ondersteunt.

Weefsel
Huid
Ziekte
Melanoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SK-MEL-29.1 (Cytion catalogusnummer 300429)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_IY54

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
19 jaar