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SK-MEL-29.1
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メラノーマ

SK-MEL-29.1

Cell line · 製品番号 300429

SK-MEL-29.1は、免疫系との相互作用、特に細胞毒性…の観点から広く研究されてきたメラノーマ細胞株である。

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01概要

説明

SK-MEL-29.1はメラノーマ細胞株であり、免疫系との相互作用、特に細胞傷害性Tリンパ球(CTL)認識について広範に研究されてきた。SK-MEL-29メラノーマ株のこのサブクローンは、自己CTLによって認識される特異的抗原を定義する免疫学的研究に用いられてきた。これらのCTLは、特定の抗原を発現しているメラノーマ細胞を選択的に標的とし、一方、非癌細胞は温存する。免疫選択実験では、SK-MEL-29.1がCTLによるメラノーマ細胞の特異的溶解に重要な安定抗原を発現していることが判明し、腫瘍の免疫原性と免疫回避に関する知見が得られた。

SK-MEL-29.1を用いた重要な研究のひとつは、がん免疫療法研究におけるSK-MEL-29.1の有用性を示すものであった。患者AV由来のCTLクローンは、複数の抗原を同時に発現するSK-MEL-29.1細胞を効果的に標的とすることが示された。このことから、SK-MEL-29.1は、メラノーマの特異的抗原を標的とする免疫応答の調整方法を理解する上で重要なモデルとなる。これらのCTLクローンがメラノーマ細胞を同定し溶解する能力は、個別化がんワクチンの可能性を含め、免疫療法戦略の開発に貴重な情報を提供する。

さらに、SK-MEL-29.1細胞はウイルスベースのがんワクチン開発でも試験されている。腫瘍溶解作用と免疫賦活作用を持つウイルスであるニューカッスル病ウイルス(NDV)に感染させたところ、SK-MEL-29.1細胞はガンマ線照射後でもNDVに効率よく感染することが示され、がん生ワクチンの開発に適した候補となった。この感染により腫瘍細胞の免疫原性が増強され、より強固な抗腫瘍免疫応答につながることから、ワクチン研究におけるSK-MEL-29.1の使用がさらに支持される。

ティッシュ
皮膚
病気
メラノーマ

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮

04識別子

引用
SK-MEL-29.1 (Cytion カタログ番号 300429)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_IY54

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
19年