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NCI-H358
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma de pulmón mínimamente invasivo
Sinónimos
NCI-H358, H-358, NCIH358

Documentos

NCI-H358

Cell line · Número de producto 300430

NCI-H358, also known as H-358 or NCIH358, is an epithelial-like cell line derived from a patient with bronchioalveolar carcinoma, a subtype of non-small c...

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01Información general

Descripción

NCI-H358, también conocida como H-358 o NCIH358, es una línea celular de tipo epitelial derivada de un paciente con carcinoma bronquioalveolar, un subtipo de cáncer de pulmón no microcítico (CPNM). Estas células presentan características ultraestructurales típicas de las células Clara, como rasgos citoplasmáticos específicos. Las células NCI-H358 son especialmente relevantes en la investigación del cáncer centrada en el CPNM, sobre todo para explorar la biología y el tratamiento de los adenocarcinomas de pulmón.

Esta línea celular es crucial para estudiar la eficacia de las terapias dirigidas al Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR), ya que las mutaciones en el EGFR son un foco importante en el tratamiento del CPNM. Además, las células NCI-H358 son valiosas para investigar el papel de las mutaciones KRAS, que son frecuentes en el cáncer de pulmón y se sabe que impulsan la actividad oncogénica. El estudio de estas mutaciones en células NCI-H358 ayuda a dilucidar las vías moleculares implicadas en la progresión del cáncer de pulmón y la resistencia a las terapias.

La línea celular NCI-H358 alberga una deleción homocigota de p53, un importante supresor tumoral. La línea celular de cáncer de pulmón H358 también se utiliza para evaluar el potencial de nuevos enfoques terapéuticos, como los SOS1 PROTAC, dirigidos a vías oncogénicas específicas.

En resumen, la línea celular NCI-H358, derivada del carcinoma bronquioalveolar, es una herramienta vital en la investigación del CPNM. Es fundamental para estudiar las terapias dirigidas al EGFR y el papel de las mutaciones KRAS en el cáncer de pulmón. Su aplicación en la investigación oncológica se extiende al desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas destinadas a mitigar los efectos de las mutaciones oncogénicas y mejorar los resultados de los pacientes con cáncer de pulmón.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma de pulmón mínimamente invasivo
Sinónimos
  • NCI-H358
  • H-358
  • NCIH358

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tipo de célula
Célula del club
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos.

04Identificadores

Referencia
NCI-H358 (número de catálogo 300430 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1559

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
UGT -, GST +, PST +, p53 -
Perfil mutacional
P53 eliminado homocigoto

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Edad no especificada
Origen étnico
Europea