Mine otse sisu juurde
NCI-H358
Kude
Kopsud
Haigus
Minimaalselt invasiivne kopsu adenokartsinoom
Sünonüümid
NCI-H358, H-358, NCIH358

Dokumendid

NCI-H358

Cell line · Toote number 300430

NCI-H358, also known as H-358 or NCIH358, is an epithelial-like cell line derived from a patient with bronchioalveolar carcinoma, a subtype of non-small c...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H358, tuntud ka kui H-358 või NCIH358, on epiteelilaadne rakuliin, mis on saadud bronkoalveolaarse kartsinoomiga patsiendilt, mis on mitteväikerakk-kopsuvähi alatüüp. Nendel rakkudel on Clara rakkudele iseloomulikud ultrastruktuurilised omadused, näiteks spetsiifilised tsütoplasma tunnused. NCI-H358 rakud on eriti olulised NSCLC-le keskendunud vähiuuringutes, eriti kopsu adenokartsinoomide bioloogia ja ravi uurimiseks.

See rakuliin on oluline epidermise kasvufaktori retseptorile (EGFR) suunatud ravimeetodite tõhususe uurimiseks, kuna EGFR-i mutatsioonid on NSCLC ravis olulisel kohal. Lisaks on NCI-H358 rakud väärtuslikud KRAS-mutatsioonide rolli uurimiseks, mis on levinud kopsuvähi puhul ja mis teadaolevalt põhjustavad onkogeenset aktiivsust. Nende mutatsioonide uurimine NCI-H358 rakkudes aitab selgitada molekulaarseid radu, mis on seotud kopsuvähi progresseerumise ja raviresistentsusega.

NCI-H358 rakuliinil on homosügootne peamise tuumori supressori p53 deletsioon. H358 kopsuvähi rakuliini kasutatakse ka selleks, et hinnata uute ravimeetodite, näiteks SOS1 PROTACi potentsiaali, mis on suunatud konkreetsetele onkogeensetele radadele.

Kokkuvõttes on NCI-H358 rakuliin, mis on saadud bronkoalveolaarsest kartsinoomist, oluline vahend NSCLC uurimisel. See on oluline EGFR-ile suunatud ravimeetodite ja KRAS-mutatsioonide rolli uurimiseks kopsuvähis. Selle kasutamine vähiuuringutes ulatub uute ravistrateegiate väljatöötamiseni, mille eesmärk on leevendada onkogeensete mutatsioonide mõju ja parandada patsientide tulemusi kopsuvähi puhul.

Kude
Kopsud
Haigus
Minimaalselt invasiivne kopsu adenokartsinoom
Sünonüümid
  • NCI-H358
  • H-358
  • NCIH358

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Klubi rakk
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel.

04Tunnused

Viide
NCI-H358 (Cytioni katalooginumber 300430)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1559

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
UGT -, GST +, PST +, p53 -
Mutatsiooniprofiil
P53 homosügootiliselt eemaldatud

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata vanus
Etniline kuuluvus
Euroopa