Přejít na obsah
NCI-H358
Tkáň
Plíce
Nemoc
Minimálně invazivní adenokarcinom plic
Synonyma
NCI-H358, H-358, NCIH358

Dokumenty

NCI-H358

Cell line · Číslo výrobku 300430

NCI-H358, also known as H-358 or NCIH358, is an epithelial-like cell line derived from a patient with bronchioalveolar carcinoma, a subtype of non-small c...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

NCI-H358, známá také jako H-358 nebo NCIH358, je epiteliální buněčná linie odvozená od pacienta s bronchioalveolárním karcinomem, podtypem nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC). Tyto buňky vykazují ultrastrukturální charakteristiky typické pro Clara buňky, jako jsou specifické cytoplazmatické znaky. Buňky NCI-H358 jsou zvláště důležité pro výzkum rakoviny zaměřený na NSCLC, zejména pro zkoumání biologie a léčby plicních adenokarcinomů.

Tato buněčná linie má zásadní význam pro studium účinnosti terapií zaměřených na receptor epidermálního růstového faktoru (EGFR), protože mutace v EGFR jsou významným předmětem léčby NSCLC. Kromě toho jsou buňky NCI-H358 cenné pro zkoumání role mutací KRAS, které jsou u karcinomu plic rozšířené a o nichž je známo, že podporují onkogenní aktivitu. Studium těchto mutací v buňkách NCI-H358 pomáhá objasnit molekulární cesty, které se podílejí na progresi rakoviny plic a rezistenci vůči léčbě.

Buněčná linie NCI-H358 obsahuje homozygotní deleci p53, hlavního nádorového supresoru. Buněčná linie H358 pro karcinom plic se také používá k posouzení potenciálu nových terapeutických přístupů, jako je SOS1 PROTAC, zaměřených na specifické onkogenní dráhy.

Lze shrnout, že buněčná linie NCI-H358, odvozená z bronchioalveolárního karcinomu, je důležitým nástrojem ve výzkumu NSCLC. Je důležitá pro studium terapií cílených na EGFR a role mutací KRAS u karcinomu plic. Jeho využití ve výzkumu rakoviny se rozšiřuje na vývoj nových terapeutických strategií zaměřených na zmírnění účinků onkogenních mutací a zlepšení výsledků léčby pacientů s rakovinou plic.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Minimálně invazivní adenokarcinom plic
Synonyma
  • NCI-H358
  • H-358
  • NCIH358

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Klubová buňka
Tumorogenní
Ano, na nahých myších.

04Identifikátory

Citace
NCI-H358 (katalogové číslo Cytion 300430)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1559

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
UGT -, GST +, PST +, p53 -
Mutační profil
Homozygotně odstraněný P53

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Věk nespecifikován
Etnická příslušnost
Evropská