Pāriet uz saturu
NCI-H358
Audums
Plaušas
Slimība
Minimāli invazīva plaušu adenokarcinoma
Sinonīmi
NCI-H358, H-358, NCIH358

Dokumenti

NCI-H358

Cell line · Preces numurs 300430

NCI-H358, also known as H-358 or NCIH358, is an epithelial-like cell line derived from a patient with bronchioalveolar carcinoma, a subtype of non-small c...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H358, pazīstama arī kā H-358 vai NCIH358, ir epitēlijveidīga šūnu līnija, kas iegūta no pacienta ar bronhiolārijas karcinomu, kas ir nesmalto šūnu plaušu vēža (NSCLC) apakštips. Šīm šūnām piemīt Klāras šūnām raksturīgas ultrastrukturālas īpašības, piemēram, specifiskas citoplazmas pazīmes. NCI-H358 šūnas ir īpaši nozīmīgas vēža pētījumos, kas vērsti uz NSCLC, jo īpaši, lai izpētītu plaušu adenokarcinomu bioloģiju un ārstēšanu.

Šai šūnu līnijai ir būtiska nozīme, lai pētītu to terapiju efektivitāti, kas vērstas pret epidermālā augšanas faktora receptoru (EGFR), jo EGFR mutācijas ir nozīmīgs NSCLC ārstēšanas aspekts. Turklāt NCI-H358 šūnas ir vērtīgas, lai pētītu KRAS mutāciju nozīmi, kas ir plaši izplatītas plaušu vēža gadījumā un, kā zināms, veicina onkogēnu aktivitāti. Šo mutāciju izpēte NCI-H358 šūnās palīdz noskaidrot molekulāros ceļus, kas saistīti ar plaušu vēža progresēšanu un rezistenci pret terapiju.

NCI-H358 šūnu līnijā ir homozigotiska galvenā audzēja supresora p53 dzēšana. H358 plaušu vēža šūnu līniju izmanto arī, lai novērtētu jaunu terapeitisko pieeju, piemēram, SOS1 PROTAC, potenciālu, kuru mērķis ir vērsties pret konkrētiem onkogēniem ceļiem.

Kopumā NCI-H358 šūnu līnija, kas iegūta no bronhiālās alveolārās karcinomas, ir būtisks NSCLC pētījumu instruments. Tā ir noderīga, lai pētītu uz EGFR vērstu terapiju un KRAS mutāciju nozīmi plaušu vēža attīstībā. Tās pielietojums vēža pētniecībā ir paplašināts, lai izstrādātu jaunas terapeitiskās stratēģijas, kuru mērķis ir mazināt onkogēno mutāciju ietekmi un uzlabot pacientu iznākumu plaušu vēža gadījumā.

Audums
Plaušas
Slimība
Minimāli invazīva plaušu adenokarcinoma
Sinonīmi
  • NCI-H358
  • H-358
  • NCIH358

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Kluba šūna
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm.

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H358 (Cytion kataloga numurs 300430)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1559

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
UGT -, GST +, PST +, p53 -
Mutāciju profils
Homozigotiski dzēsts P53

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Vecums nav precizēts
Etniskā piederība
Eiropas