Siirry sisältöön
NCI-H358
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Minimaalisesti invasiivinen keuhkojen adenokarsinooma
Synonyymit
NCI-H358, H-358, NCIH358

Asiakirjat

NCI-H358

Cell line · Tuotenumero 300430

NCI-H358, also known as H-358 or NCIH358, is an epithelial-like cell line derived from a patient with bronchioalveolar carcinoma, a subtype of non-small c...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H358, joka tunnetaan myös nimellä H-358 tai NCIH358, on epiteelin kaltainen solulinja, joka on peräisin potilaalta, jolla on bronkioalveolaarinen karsinooma, ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC) alatyyppi. Näillä soluilla on Clara-soluille tyypillisiä ultrastruktuurisia ominaisuuksia, kuten erityisiä sytoplasman piirteitä. NCI-H358-solut ovat erityisen tärkeitä NSCLC:hen keskittyvässä syöpätutkimuksessa, erityisesti keuhkojen adenokarsinoomien biologian ja hoidon tutkimisessa.

Tämä solulinja on ratkaisevan tärkeä tutkittaessa epidermaalisen kasvutekijän reseptoriin (EGFR) kohdistuvien hoitojen tehokkuutta, sillä EGFR:n mutaatiot ovat merkittävä painopiste NSCLC:n hoidossa. Lisäksi NCI-H358-solut ovat arvokkaita tutkittaessa KRAS-mutaatioiden roolia, jotka ovat yleisiä keuhkosyövässä ja joiden tiedetään aiheuttavan onkogeenistä toimintaa. Näiden mutaatioiden tutkiminen NCI-H358-soluissa auttaa selvittämään keuhkosyövän etenemiseen ja hoitoresistenssiin liittyviä molekyylireittejä.

NCI-H358-solulinjassa on homotsygoottinen p53:n, tärkeimmän kasvainsuppressorin, poistuma. H358-keuhkosyöpäsolulinjaa käytetään myös arvioitaessa sellaisten uusien terapeuttisten lähestymistapojen, kuten SOS1 PROTAC:ien, mahdollisuuksia, joilla pyritään vaikuttamaan tiettyihin onkogeenisiin reitteihin.

Yhteenvetona voidaan todeta, että NCI-H358-solulinja, joka on peräisin keuhkoalveolaarisesta karsinoomasta, on elintärkeä väline NSCLC-tutkimuksessa. Se on tärkeä väline EGFR:ään kohdistettujen hoitojen ja KRAS-mutaatioiden roolin tutkimisessa keuhkosyövässä. Sen käyttö syöpätutkimuksessa ulottuu uusien hoitostrategioiden kehittämiseen, joilla pyritään lieventämään onkogeenisten mutaatioiden vaikutuksia ja parantamaan keuhkosyöpäpotilaiden hoitotuloksia.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Minimaalisesti invasiivinen keuhkojen adenokarsinooma
Synonyymit
  • NCI-H358
  • H-358
  • NCIH358

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Kerhon solu
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä.

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H358 (Cytionin luettelonumero 300430)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1559

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
UGT -, GST +, PST +, p53 -
Mutaatioprofiili
P53 homotsygoottisesti poistettu

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Ikä määrittelemätön
Etnisyys
Eurooppalainen