Ga naar de inhoud
NCI-H358
Weefsel
Long
Ziekte
Minimaal invasief longadenocarcinoom
Synoniemen
NCI-H358, H-358, NCIH358

Documenten

NCI-H358

Cell line · Productnummer 300430

NCI-H358, also known as H-358 or NCIH358, is an epithelial-like cell line derived from a patient with bronchioalveolar carcinoma, a subtype of non-small c...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

NCI-H358, ook bekend als H-358 of NCIH358, is een epitheliale cellijn afkomstig van een patiënt met bronchioalveolair carcinoom, een subtype van niet-kleincellig longkanker (NSCLC). Deze cellen vertonen ultrastructurele kenmerken die typisch zijn voor Clara-cellen, zoals specifieke cytoplasmatische kenmerken. NCI-H358 cellen zijn bijzonder relevant in kankeronderzoek gericht op NSCLC, met name voor het onderzoeken van de biologie en behandeling van longadenocarcinomen.

Deze cellijn is cruciaal voor het bestuderen van de effectiviteit van therapieën gericht op de Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR), aangezien mutaties in EGFR een belangrijk aandachtspunt zijn bij de behandeling van NSCLC. Daarnaast zijn NCI-H358 cellen waardevol voor het onderzoeken van de rol van KRAS mutaties, die veel voorkomen in longkanker en waarvan bekend is dat ze oncogene activiteit stimuleren. De studie van deze mutaties in NCI-H358 cellen helpt bij het ophelderen van de moleculaire routes die betrokken zijn bij de progressie van longkanker en resistentie tegen therapieën.

De NCI-H358 cellijn bevat een homozygote deletie van p53, een belangrijke tumorsuppressor. De H358 longkanker cellijn wordt ook gebruikt om het potentieel te beoordelen van nieuwe therapeutische benaderingen, zoals SOS1 PROTACs, gericht op specifieke oncogene routes.

Samenvattend is de NCI-H358 cellijn, afgeleid van bronchioalveolair carcinoom, een essentieel instrument in NSCLC onderzoek. Ze is van groot belang voor het bestuderen van EGFR-gerichte therapieën en de rol van KRAS-mutaties in longkanker. De toepassing in kankeronderzoek strekt zich uit tot de ontwikkeling van nieuwe therapeutische strategieën gericht op het verminderen van de effecten van oncogene mutaties en het verbeteren van de resultaten voor patiënten met longkanker.

Weefsel
Long
Ziekte
Minimaal invasief longadenocarcinoom
Synoniemen
  • NCI-H358
  • H-358
  • NCIH358

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Cel
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H358 (Cytion catalogusnummer 300430)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1559

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
UGT -, GST +, PST +, p53 -
Mutatieprofiel
P53 homozygoot verwijderd

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Leeftijd onbepaald
Etnische afkomst
Europese