Siirry sisältöön
NCI-H69-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
NCI-H-69, NCI H69, H69, H-69, NCIH69, NCI-HUT-69, H69/P, NCI-H69C, H69C, H69c

Asiakirjat

NCI-H69-solut

Cell line · Tuotenumero 300185

Tämä solulinja on aneuploidinen, muodostaa pesäkkeitä pehmeässä agarissa ja säilyttää pienisoluista karsinoomaa muistuttavan morfologian ja ultrarakenteen sekä APUD-solujen ominaispiirteet...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
Tämä solulinja on aneuploidi, se muodostaa pesäkkeitä pehmeässä agarissa ja säilyttää pienisoluisen karsinooman morfologian ja ultrastruktuurin sekä APUD-solujen ominaisuudet. Solut kasvavat aggregaatteina, joten solujen lukumäärä ei ole tarkka. Linja voidaan mukauttaa kasvamaan ravistinpullossa tai pyörityspullossa. Nämä solut eivät ole resistenttejä adramysiinille.
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • NCI-H-69
  • NCI H69
  • H69
  • H-69
  • NCIH69
  • NCI-HUT-69
  • H69/P
  • NCI-H69C
  • H69C
  • H69c

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Muodostaa kasvaimia, joilla on tyypillinen pienisoluisen karsinooman histologia
Karyotyyppi
Aneuploidinen, 3p-deleetio. Vaihteluväli = 40-73
Kaksinkertaistumisaika
69 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H69 (H69) (Cytionin luettelonumero 300185)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1579

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Insuliinin kaltaisen kasvutekijä II:n reseptori (IGF II)
Proteiinin ilmentyminen
P53 negatiivinen, sytokeratiinit positiiviset
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, ES-D, 2, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.00006

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Annetaan aggregaattien laskeutua pullon pohjalle, poistetaan ja hävitetään supernatantti. Lisätään tuoretta elatusainetta, hajotetaan solut varovasti pipetoimalla ja annostellaan uusiin pulloihin. Subkultivoidaan 6-8 päivän välein.
Kylvötiheys
1 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulatuksen jälkeen solujen annetaan toipua pakastuksesta vähintään 24 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
55 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen