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Cellules GIMEN
Tissu
Cerveau
Maladie
Neuroblastome
Site métastatique
Moelle osseuse
Synonymes
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

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Cellules GIMEN

Cell line · Référence du produit 300179

La lignée cellulaire GIMEN provient d'une métastase osseuse d'un jeune enfant chez qui un neuroblastome de stade IV avait été diagnostiqué. Ces cellules sont classées dans le type N...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire GIMEN est dérivée de la métastase de la moelle osseuse d'un jeune enfant atteint d'un neuroblastome de stade IV. Ces cellules sont classées comme étant de type N, ce qui indique typiquement un phénotype neuroblastique caractérisé par une forte densité cellulaire, des propriétés neuronales et la capacité d'une croissance extensive des neurites en culture. L'établissement de la lignée cellulaire GIMEN fournit un modèle précieux pour l'étude des mécanismes moléculaires et cellulaires qui sous-tendent les formes agressives de neuroblastome, en particulier celles qui sont associées à la dissémination métastatique.

Sur le plan fonctionnel, les cellules GIMEN présentent des interactions notables avec diverses cytokines et facteurs de croissance. En particulier, leur croissance est inhibée par l'interféron-gamma (IFN-gamma), une cytokine connue pour ses effets antiprolifératifs sur certaines cellules cancéreuses. De plus, le facteur de croissance des fibroblastes 2 (FGF-2) démontre un effet antimitogène sur ces cellules, qui peut être inversé par l'ajout d'IFN-gamma. Cette inversion suggère une interaction complexe entre ces facteurs dans la modulation de la prolifération cellulaire. En outre, l'interleukine-1 bêta (IL-1 bêta) renforce les effets antimitogènes du FGF-2, ce qui indique son rôle potentiel dans la régulation de la dynamique de croissance tumorale dans le microenvironnement du neuroblastome. Ces interactions soulignent l'utilité de la lignée cellulaire GIMEN dans l'exploration de l'impact des cytokines et des facteurs de croissance sur la progression du neuroblastome et la réponse à la thérapie.

Tissu
Cerveau
Maladie
Neuroblastome
Site métastatique
Moelle osseuse
Synonymes
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Temps de doublement
25 heures

04Identifiants

Référence
GIMEN (numéro de catalogue Cytion 300179)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 à 3 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
3,5 ans
Origine ethnique
Caucasien