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Células GIMEN
Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Documentos

Células GIMEN

Cell line · Número do produto 300179

A linha celular GIMEN é derivada de uma metástase na medula óssea de uma criança pequena diagnosticada com neuroblastoma em fase IV. Estas células são classificadas como do tipo N...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular GIMEN é derivada de metástases da medula óssea de uma criança diagnosticada com neuroblastoma de fase IV. Estas células são classificadas como sendo do tipo N, o que normalmente indica um fenótipo neuroblástico caracterizado por uma elevada densidade celular, propriedades neuronais e a capacidade de crescimento extensivo de neurites em cultura. A criação da linha de células GIMEN constitui um modelo valioso para o estudo dos mecanismos moleculares e celulares subjacentes às formas agressivas de neuroblastoma, particularmente as associadas à disseminação metastática.

Funcionalmente, as células GIMEN apresentam interações notáveis com várias citocinas e factores de crescimento. Especificamente, o seu crescimento é inibido pelo interferão-gama (IFN-gama), uma citocina conhecida pelos seus efeitos antiproliferativos em certas células cancerígenas. Além disso, o fator de crescimento de fibroblastos-2 (FGF-2) demonstra um efeito antimitogénico nestas células, que pode ser revertido pela adição de IFN-gama. Esta inversão sugere uma interação complexa entre estes factores na modulação da proliferação celular. Adicionalmente, a interleucina-1 beta (IL-1 beta) aumenta os efeitos antimitogénicos do FGF-2, indicando o seu potencial papel na regulação da dinâmica de crescimento tumoral no microambiente do neuroblastoma. Estas interações realçam a utilidade da linha celular GIMEN na exploração do impacto das citocinas e dos factores de crescimento na progressão do neuroblastoma e na resposta à terapêutica.

Tecido
Cérebro
Doença
Neuroblastoma
Local da metástase
Medula óssea
Sinónimos
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tempo de duplicação
25 horas

04Identificadores

Referência
GIMEN (número de catálogo Cytion 300179)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
3,5 anos
Etnia
Caucasiano