Mine otse sisu juurde
GIMENi rakud
Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumendid

GIMENi rakud

Cell line · Toote number 300179

GIMEN-rakuliin on saadud IV staadiumi neuroblastoomiga diagnoositud väikese lapse luuüdi metastaasist. Neid rakke klassifitseeritakse N-tüüpi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

GIMENi rakuliin on saadud noore lapse luuüdi metastaasidest, kellel on diagnoositud IV staadiumi neuroblastoom. Need rakud on klassifitseeritud N-tüüpi, mis tavaliselt näitab neuroblastilist fenotüüpi, mida iseloomustab suur rakutihedus, neuronaalsed omadused ja võime ulatuslikuks neuriitide väljapressimiseks kultuuris. GIMENi rakuliini loomine annab väärtusliku mudeli neuroblastoomi agressiivsete vormide, eelkõige metastaatilise levikuga seotud molekulaar- ja rakumehhanismide uurimiseks.

Funktsionaalselt on GIMENi rakkudel märkimisväärne koostoime erinevate tsütokiinide ja kasvufaktoritega. Eelkõige pärsib nende kasvu interferoon-gamma (IFN-gamma), tsütokiin, mis on tuntud oma antiproliferatiivse mõju poolest teatavatele vähirakkudele. Lisaks sellele avaldab fibroblastide kasvufaktor-2 (FGF-2) nendele rakkudele antimitogeenset mõju, mida saab IFN-gamma lisamisega muuta. See pöördumine viitab nende faktorite vahelisele keerulisele koostoimele rakkude proliferatsiooni moduleerimisel. Lisaks suurendab interleukiin-1 beeta (IL-1 beeta) FGF-2 antimitogeenset mõju, mis näitab selle võimalikku rolli neuroblastoomi mikrokeskkonna kasvudünaamika reguleerimisel. Need koostoimed rõhutavad GIMENi rakuliini kasulikkust tsütokiinide ja kasvufaktorite mõju uurimisel neuroblastoomi progresseerumisele ja ravivastusele.

Kude
Aju
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Kahekordistumisaeg
25 tundi

04Tunnused

Viide
GIMEN (Cytioni katalooginumber 300179)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
3,5 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia