Gå direkte til indholdet
GIMEN-celler
Væv
Hjerne
Sygdom
Neuroblastom
Metastasested
Knoglemarv
Synonymer
Gi-ME-N, Gi-MEN, GI-ME-N, Gimen, Gimen1, Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

Dokumenter

GIMEN-celler

Cell line · Varenummer 300179

GIMEN-cellelinjen stammer fra en knoglemarvsmetastase hos et lille barn, der var blevet diagnosticeret med neuroblastom i stadium IV. Disse celler klassificeres som N-type...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

GIMEN-cellelinjen stammer fra knoglemarvsmetastaser fra et lille barn, der er diagnosticeret med neuroblastom i stadium IV. Disse celler er klassificeret som N-type, hvilket typisk indikerer en neuroblastisk fænotype, der er kendetegnet ved høj celletæthed, neuronale egenskaber og evnen til omfattende neuritudvækst i kultur. Etableringen af GIMEN-cellelinjen giver en værdifuld model til undersøgelse af de molekylære og cellulære mekanismer, der ligger til grund for aggressive former for neuroblastom, især dem, der er forbundet med metastatisk spredning.

Funktionelt udviser GIMEN-celler bemærkelsesværdige interaktioner med forskellige cytokiner og vækstfaktorer. Specifikt hæmmes deres vækst af interferon-gamma (IFN-gamma), et cytokin, der er kendt for sine antiproliferative virkninger på visse kræftceller. Desuden har fibroblastvækstfaktor-2 (FGF-2) en antimitogen effekt på disse celler, som kan ophæves ved tilsætning af IFN-gamma. Denne reversering tyder på et komplekst samspil mellem disse faktorer i moduleringen af celleproliferation. Derudover forstærker interleukin-1 beta (IL-1 beta) de antimitogene effekter af FGF-2, hvilket indikerer dens potentielle rolle i reguleringen af tumorvækstdynamikken i neuroblastom-mikromiljøet. Disse interaktioner fremhæver GIMEN-cellelinjens anvendelighed i udforskningen af cytokiners og vækstfaktorers indvirkning på neuroblastoms progression og respons på behandling.

Væv
Hjerne
Sygdom
Neuroblastom
Metastasested
Knoglemarv
Synonymer
  • Gi-ME-N
  • Gi-MEN
  • GI-ME-N
  • Gimen
  • Gimen1
  • Gaslini Institute-ME-Neuroblastoma

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Fordoblingstid
25 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
GIMEN (Cytion katalognummer 300179)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1232

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 til 3 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
3,5 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk